產(chǎn)品名稱:PCR試劑盒
英文名稱:Fusarium moniliformeVPCR
編號: FSP1680
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
AQP3水通道蛋白-3抗體特價促銷anti- GLOD4 antibody細胞氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性比色法定量檢測試劑盒磷酸化p21激活激酶4/5/6抗體
C12ORF5312號染色體開放閱讀框53抗體特價促銷anti- GLPK antibody組織氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性比色法定量檢測試劑盒磷酸化p21激活激酶1/2抗體
C12ORF5412號染色體開放閱讀框54抗體特價促銷anti- GLRA1 antibody血液氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性比色法定量檢測試劑盒磷酸化p21激活激酶2抗體
phospho-AQP2(Ser269)磷酸化水通道蛋白2抗體特價促銷anti- GLRA2 antibody細胞氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性熒光定量檢測試劑盒磷酯酶Cγ2抗體
C12ORF6112號染色體開放閱讀框61抗體特價促銷anti- GLRA3 antibody組織氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性熒光定量檢測試劑盒磷酸化血小板源性生長因子受體-α抗體
C12ORF6312號染色體開放閱讀框63抗體特價促銷anti- GLRB antibody血液氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性熒光定量檢測試劑盒神經(jīng)叢蛋白A1抗體
C12ORF6812號染色體開放閱讀框68抗體特價促銷anti- GLRX antibody細胞過氧化氫酶(CATALASE)催化活性比色法定量檢測試劑盒庚型肝炎多聚蛋白抗體
CRCT1富含半胱氨酸C端蛋白1抗體特價促銷anti- GLRX2 antibody血液過氧化氫酶(CATALASE)催化活性比色法定量檢測試劑盒尿激酶型纖溶酶原激活因子受體抗體
PCR試劑盒Aspergillus anomalus Pidoplichko et Kirilen ..FAM156A/TMEM2 跨膜蛋白29抗體綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒Tilmicosin 替米考星
Homo sapiens, humanFAM160B1 FAM160B1蛋白抗體布魯氏桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒Tilmicosin 替米考星
Homo sapiens, humanFAM161B FAM161B蛋白抗體豬布魯氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒Enrofloxacin 恩諾沙星
Fusarium oxysporum Schlechtendahl, anamorphFAM164B FAM164B蛋白抗體水牛正痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒Enrofloxacin 恩諾沙星
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..FAHD2A 延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗體牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Levofloxacin 左氧氟沙星
driedFAM101A FAM101A蛋白抗體羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Norfloxacin 諾氟沙星
Pythium oligandrum DrechslerFAM102B FAM102B蛋白抗體洋蔥伯克氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒Norfloxacin 諾氟沙星
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..FAM104B FAM104B蛋白抗體鼻疽伯克霍爾德氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒Ofloxacin 氧氟沙星
關鍵字: PCR試劑盒;50T;FSP1680;
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