產(chǎn)品名稱:產(chǎn)氣腸桿菌PCR試劑盒
英文名稱:Enterobacter aerogenesPCR
編號(hào): FSP1602
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
MARCH4膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體特價(jià)促銷anti- ETS2 antibody10倍TBST濃縮緩沖清理溶液還原型輔酶Ⅱ/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸抗體
MARCH5膜相關(guān)環(huán)指蛋白5抗體特價(jià)促銷anti- ETV4 antibody10倍PBST濃縮緩沖清理溶液NIT2蛋白抗體
MARCH6膜相關(guān)環(huán)指蛋白6抗體特價(jià)促銷anti- ETV5 antibody10倍Tris-T濃縮緩沖清理溶液神經(jīng)細(xì)胞分化因子1抗體
MARCH7/Axotrophin膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體特價(jià)促銷anti- ETV6 antibody透射電鏡(TEM)制片處理試劑盒NCK銜接蛋白1抗體
MARCH8膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體特價(jià)促銷anti- ETV6 antibody透射電鏡(TEM)制片處理固著液分化相關(guān)基因NDRG1抗體
MARCH9膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體特價(jià)促銷anti- EVI1 antibody透射電鏡(TEM)制片處理清洗液神經(jīng)降壓素抗體
MARCH10膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體特價(jià)促銷anti- EVI2A antibody透射電鏡(TEM)制片處理脫水液核受體輔助抑制因子2抗體
MARCH11膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體特價(jià)促銷anti- Evi2a antibody透射電鏡(TEM)制片處理包埋液跨膜受體蛋白Notch-1抗體
產(chǎn)氣腸桿菌PCR試劑盒Human Moesin ELISA KitDAP3 死亡相關(guān)蛋白3抗體三氟甲苯酸進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)THRA1 狀激受體α1抗體含量:含量測(cè)定
Human MLK4(Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 21) ELISA KitHAX1 造血干細(xì)胞特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體四氫葉酸米諾地爾進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)THRA1+2 狀激受體α1+α2抗體含量:含量測(cè)定
Human MUC2(Mucin-2) ELISA KitNS5ATP9/KIAA0101 丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白5A反式激活蛋白9抗體四氫葉酸羥進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)BCAR1 癌抗雌激耐藥蛋白1含量:含量測(cè)定
Human MLN51/CASC3 ELISA KitMFF 線粒體裂變因子MFF抗體四氫葉酸十一酸進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)AF10/MLLT10 髓系、淋巴、混合系白血病易位因10抗體含量:HPLC法含量測(cè)定
Human MLK3(Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 11) ELISA KitMICS1 生長(zhǎng)激素誘導(dǎo)跨膜蛋白抗體(真皮乳頭源性蛋白2)四氫葉酸石杉進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)phospho-BCAR1(Tyr410) 酸化癌抗雌激耐藥蛋白1含量:HPLC法含量測(cè)定
Human MPND ELISA KitMTCH1 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白60(早老素相關(guān)蛋白)L-焦谷氨酸叔丁酯雙嘧達(dá)莫進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)CAMK1D 鈣調(diào)蛋白激酶CaMK1D抗體含量:檢查
Human MPHOSPH6 ELISA KitMTCH2 線粒體載體同源蛋白2抗體L-焦谷氨酸叔丁酯魚腥草鈉進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)DDX43/CT13 腫瘤/抗原13抗體含量:檢查
Human MPP1 ELISA KitMTFR1 線粒體裂變調(diào)節(jié)蛋白1抗體三乙胺鹽酸鹽維生B12進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)GIG22/DNAJC15 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制蛋白22抗體(化控制J蛋白)含量:含量測(cè)定
關(guān)鍵字: 產(chǎn)氣腸桿菌;PCR試劑盒;50T;FSP1602;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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