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小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞,RAW 264.7
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小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞

價(jià)格 1350
包裝 1*10^6
最小起訂量 1*10^6
發(fā)貨地 上海
更新日期 2020-09-10

產(chǎn)品詳情

中文名稱:小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:RAW 264.7
保存條件: -80℃純度規(guī)格: 99.99%
產(chǎn)品類別: 生物試劑 細(xì)胞
2020-09-10 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 RAW 264.7 1*10^6/1350RMB 1350 -80℃ 99.99% 生物試劑 細(xì)胞

RAW 264.7 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞描述

此細(xì)胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤。sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細(xì)胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒,XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性。可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖??梢钥贵w依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞。LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)分解紅血球但對腫瘤靶細(xì)胞無作用。

細(xì)胞特性

1) 來源:鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤;單核細(xì)胞;巨噬細(xì)胞

2) 形態(tài):不規(guī)則圓形,紡錘狀,傳代時(shí)密度要大,易分化

3) 含量:>1x106 個(gè)

4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

運(yùn)輸和保存

可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式

(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;

(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細(xì)胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。

細(xì)胞用途:僅供科研使用。

細(xì)胞接收后的處理

1) 收到細(xì)胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2) 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請?jiān)?0X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3) 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。

4) 貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。

5) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基)。

6)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。                     

RAW 264.7 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一. 培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備:DMEM(包含2mM  L-谷氨酰胺,0.11g / L 丙酮酸鈉)(推薦iCell-0001) 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清10%;P/S  1%

注意:DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)要確認(rèn)下培養(yǎng)基中谷氨酰胺、丙酮酸鈉是否添加,如果沒有添加,在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)技術(shù)人員要添加谷氨酰胺、丙酮酸鈉。傳代時(shí)密度要大,易分化。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

該細(xì)胞用細(xì)胞刮鏟替代胰酶來對細(xì)胞進(jìn)行處理。(注:傳代時(shí),吸走部分培養(yǎng)液,留下少許培養(yǎng)液(如T75培養(yǎng)瓶留下10ml),用無菌細(xì)胞刮鏟刮拭細(xì)胞附著培養(yǎng)表面將細(xì)胞刮落,收集細(xì)胞后離心去上清,重懸后接種到新的裝有新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)或?qū)?xì)胞進(jìn)行凍存)。

沒有準(zhǔn)備細(xì)胞刮鏟的客戶可以采用胰酶消化來處理,

1. 該細(xì)胞比較難消化,同時(shí)用胰酶消化來處理細(xì)胞對細(xì)胞傷害較大。

2. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

3. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

4. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

5. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6-8ml培養(yǎng)基的T25瓶中培養(yǎng)。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。

下面T25瓶為類;

1,細(xì)胞用細(xì)胞刮鏟替代胰酶來對細(xì)胞進(jìn)行處理。(注:傳代時(shí),吸走部分培養(yǎng)液,留下少許培養(yǎng)液(如T75培養(yǎng)瓶留下10ml),用無菌細(xì)胞刮鏟刮拭細(xì)胞附著培養(yǎng)表面將細(xì)胞刮落。 

2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。

3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,過夜(至少4個(gè)小時(shí))以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項(xiàng)

 

1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。

3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。

4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

關(guān)鍵字: 細(xì)胞;原代細(xì)胞;細(xì)胞培養(yǎng);RAW 264.7;STR細(xì)胞;

公司簡介

賽百慷( 上海 )生物技術(shù)股份有限公司( iCell Bioscience Inc,Shanghai )是一家專注于研發(fā)生產(chǎn)高品質(zhì)人體組織源及動物組織源原代細(xì)胞、細(xì)胞系、iPS細(xì)胞等產(chǎn)品,并提供專業(yè)技術(shù)服務(wù)外包的高新技術(shù)企業(yè),公司總部位于上海。 賽百慷眾多在國內(nèi)國外細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域里有著深厚造詣和豐富經(jīng)驗(yàn)的高端專業(yè)技術(shù)人才,其中不乏國際頂級的科學(xué)家及科學(xué)家團(tuán)隊(duì),聚集全球原代細(xì)胞及iPS細(xì)胞領(lǐng)域的前沿技術(shù)研發(fā),逐步形成我國首個(gè)開展廣泛國際合作的細(xì)胞產(chǎn)業(yè)聚集地。 賽百慷公司已經(jīng)引進(jìn)了生命科學(xué)領(lǐng)域的全套實(shí)驗(yàn)設(shè)備,建立了一流的生產(chǎn)研發(fā)實(shí)驗(yàn)室,采用了國際先進(jìn)的行業(yè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)、制造工藝、質(zhì)檢流程。 公司還積極多方引入資金,打造綜合研發(fā)平臺,力爭率先引領(lǐng)中國iPS細(xì)胞的科研事業(yè)進(jìn)程,已與國內(nèi)外多家大學(xué)、科研院所、藥企巨頭建立了良好的合作關(guān)系。正是憑借獨(dú)有的原代細(xì)胞領(lǐng)域原創(chuàng)技術(shù)的優(yōu)勢。
成立日期 2014-01-27 (11年) 注冊資本 500萬
員工人數(shù) 10-50人 年?duì)I業(yè)額 ¥ 500萬-1000萬
主營行業(yè) 細(xì)胞培養(yǎng),蛋白組學(xué),分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué) 經(jīng)營模式 工廠,試劑,定制,服務(wù)
  • 賽百慷(上海)生物技術(shù)股份有限公司
非會員
  • 公司成立:11年
  • 注冊資本:500萬
  • 企業(yè)類型:股份有限公司
  • 主營產(chǎn)品:原代細(xì)胞,細(xì)胞,iPS細(xì)胞,干細(xì)胞,CRO細(xì)胞實(shí)驗(yàn)服務(wù)
  • 公司地址:上海市徐匯區(qū)聚科生物園銀都路466號3號樓2層;郵編:200000
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