抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
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英文名稱
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Anti-phospho-ATF2 (Ser480)
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規(guī)格
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0.1ml/100μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-phospho-ATF2 (Ser480)
中文名稱 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
別 名 ATF2 (phospho S480); p-ATF2 (phospho S480); p-ATF2 (phospho Ser480); ATF2(Phospho-Ser480); CREB 2; HB 16; Activating Transcription Factor 2; ATF 2; Atf-2; ATF2 protein; cAMP Response Element Binding Protein 2; cAMP response element binding protein CRE BP1; cAMP-dependent transcription factor ATF-2; cAMP-responsive element-binding protein 2; CRE BP1; CRE-BP; CREB 2; CREB2; CREBP1; Cyclic AMP dependent transcription factor ATF 2; Cyclic AMP-responsive; ATF2_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 轉(zhuǎn)運蛋白 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 45kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human ATF2 around the phosphorylation site of Ser480
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
CKS2 ELISA Kit>98%肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C試劑盒
Claudin 23 ELISA Kit>98%肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B試劑盒
CREB1 ELISA Kit>95%肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A試劑盒
CREB3L2 ELISA Kit>95%肺表面活性蛋白D試劑盒
CREST ELISA Kit>95%肺癌標(biāo)志物DR-70試劑盒
CRMP1 ELISA Kit>95%腓骨蛋白2試劑盒
Claudin 7 ELISA Kit進(jìn)口原裝Biowest 111860;電泳級肥胖抑制素試劑盒
CLEC10A/CD301 ELISA KitBR肥大細(xì)胞類胰凝乳蛋白酶elisa試劑盒
CPOX(Coproporphyrinogen oxidase) ELISA KitEach g exchanges 1.8 g- 2.2 g of sodium glycocholate肥大細(xì)胞類胰蛋白酶試劑盒
CIN85 ELISA Kit分子生物學(xué)級肥大細(xì)胞類羧肽酶elisa試劑盒
CREB1 ELISA Kit≥98%,BR非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原211試劑盒
CKAP4 ELISA Kit>99%,AR非甲基化寡核苷酸試劑盒
CKS2 ELISA Kit>99%,分子生物學(xué)級防御素 elisa試劑盒
Cortactin ELISA Kit>97.0%(GC) ,進(jìn)口芳香烴受體試劑盒
Claudin 23 ELISA KitFMB Grade泛素結(jié)合酶E2D2試劑盒
CREB3L2 ELISA Kit分子生物學(xué)級,>60 U/mg,10 mg/ml泛素結(jié)合酶E2D1試劑盒
CREST ELISA Kit>99%,BR泛素激活酶試劑盒
CREB1 ELISA Kit>99%,分子生物學(xué)級泛素蛋白試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 Pseudomonas│oryzihabitans種屬:Pseudomonas│oryzihabitans
分離基物:土壤
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:可以在含1000mg/l的芐磺隆的無機鹽培養(yǎng)基:中生長
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:33
生長條件:30℃
存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法棲稻假單胞菌