抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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磷酸化水通道蛋白2抗體
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英文名稱
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Anti-phospho-AQP2 (Ser256)
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規(guī)格
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0.1ml/100μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-phospho-AQP2 (Ser256)
中文名稱 磷酸化水通道蛋白2抗體
別 名 Aquaporin 2 (phospho S256); Aquaporin 2 (phospho Ser256); p-Aquaporin 2 (phospho S256); p-Aquaporin 2 (S256); ADH water channel; AQP 2; AQP CD; AQP2; AQPCD; Aquaporin 2 collecting duct; Aquaporin CD; Aquaporin2; Aquaporine 2; Collecting duct water channel protein; MGC34501; Water channel protein for renal collecting duct; WCH CD; WCHCD; AQP2_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Monkey
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 細(xì)胞粘附分子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 29kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human AQP2 around the phosphorylation site of Ser256
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是磷酸化水通道蛋白2抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
ECHS1 ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品干擾素誘導(dǎo)蛋白10試劑盒
EEF1G ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子試劑盒
ECH1 ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品干擾素活化基因205試劑盒
DR3 ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品干擾素調(diào)節(jié)因子8試劑盒
ECM2 ELISA KitGC≥98%,BR干擾素調(diào)節(jié)因子3試劑盒
DTX3L(E3 ubiquitin-protein ligase DTX3L) ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品干擾素a-抗體試劑盒
E2F4 ELISA Kit>99%,BR鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶2C型成員1試劑盒
EDAR ELISA KitHPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1試劑盒
EDC3 ELISA KitHPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品鈣依賴性胞漿型磷脂酶A2試劑盒
EDC4 ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品鈣衛(wèi)蛋白elisa試劑盒
E2F7 ELISA KitHPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品鈣網(wǎng)蛋白試劑盒
E2F8 ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品鈣聯(lián)蛋白試劑盒
DNAJC2/MPP11 ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品鈣離子通道抗體試劑盒
DAPK1 ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品鈣結(jié)合蛋白S100A14 elisa試劑盒
DOCK180 ELISA Kit≥98%,甘草提取鈣結(jié)合蛋白S100A13 elisa試劑盒
DPPA4 ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品鈣結(jié)合蛋白試劑盒
DCBLD2 ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品鈣激活中性蛋白酶6試劑盒
DCC(Netrin receptor DCC) ELISA KitHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品鈣激活中性蛋白酶1試劑盒
磷酸化水通道蛋白2抗體 Bipolaris│sorokiniana種屬:Bipolaris│sorokiniana
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:14
生長條件:18-22℃麥根腐平臍蠕孢