抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
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英文名稱
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Anti-phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491)
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規(guī)格
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0.1ml/100μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491)
中文名稱 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
別 名 AMPK alpha 2(Ser485+Ser491); AMPK alpha 1 + AMPK alpha 2 (phospho S485 + S491); 5 AMP activated protein kinase alpha 1catalytic subunit; 5 AMP activated protein kinase catalytic alpha 1 chain; 5' AMP activated protein kinase catalytic subunit alpha 1; AAPK1;acetyl CoA carboxylase kinase;AI194361 antibody AI450832 ;AL024255 ;AMP -activate kinase alpha 1 subunit;AMP-activated protein kinase, catalytic, alpha -1;AMPK 1;AMPK alpha 1 chain;AMPK antibody AMPK1; AMPKa1;AMPKalpha1;C130083N04Rik;cb116 antibody EC 2.7.11.1; HMG CoA reductase kinase;hormone sensitive lipase kinase;im:7154392 antibody kinase AMPK alpha1 ;MGC33776;MGC57364 antibody PRKAA 1;PRKAA1;Protein kinase AMP activated alpha 1 catalytic subunit; SNF1-like protein AMPK;wu:fa94c10.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 激酶和磷酸酶 Alzheimer's
蛋白分子量 predicted molecular weight: 63kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from mouse AMPK alpha-1 around the phosphorylation site of Ser485/491
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
FXYD4 ELISA KitIND抗黃體生成素抗體試劑盒
FXYD6 ELISA KitIND抗環(huán)胍氨酸肽試劑盒
FXYD7 ELISA Kit>99%,進(jìn)分抗琥珀酸脫氫酶黃素亞單位抗體試劑盒
FUT10 ELISA Kit>99%,BR抗呼吸道合胞病毒抗體試劑盒
FYTTD1 ELISA Kit>99%抗呼吸道合胞病毒試劑盒
FUT4 ELISA Kit>98%抗呼吸道合胞病毒試劑盒
FUT7 ELISA Kit>97%抗紅細(xì)胞抗體試劑盒
FUT11 ELISA Kit純度≥98%抗核周因子試劑盒
FUT8 ELISA Kit≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗核小體抗體IgG試劑盒
FUCA2 ELISA Kit>98.5%,選擇性活化Ⅹ因子抑制劑抗核糖體P蛋白抗體試劑盒
FUK ELISA Kit>98%,蛋白激酶B(Akt)信號通路阻斷劑抗核糖核蛋白抗體試劑盒
FUT9 ELISA Kit>98%抗核仁抗體試劑盒
Fukutin ELISA Kit>98%抗核抗體試劑盒
FUSIP1 ELISA Kit>98%,三水合物抗骨骼肌抗體試劑盒
FUT10 ELISA KitHPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗弓形體試劑盒
FUT11 ELISA Kit>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)抗弓形體試劑盒
FUT4 ELISA Kit>99%,美國進(jìn)口sc-202975抗肝細(xì)胞膜抗體試劑盒
FUT7 ELISA KitHPLC≥98.0%抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體試劑盒
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 Bacillus│subtilis subsp. Inaquosorum種屬:Bacillus│subtilis subsp. Inaquosorum
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:441
生長條件:37℃
存儲條件:真空冷凍干燥法枯草芽孢桿菌沙漠亞種