抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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B淋巴細(xì)胞銜接分子DAPP1抗體
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英文名稱
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Anti-DAPP1/BAM32
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-DAPP1/BAM32
中文名稱 B淋巴細(xì)胞銜接分子DAPP1抗體
別 名 B cell adapter molecule of 32 kDa; B lymphocyte adapter protein Bam32; B-cell adapter molecule of 32 kDa; BAM32; DAPP1; DAPP1_HUMAN; DKFZp667E0716; Dual adapter for phosphotyrosine and 3-phosphotyrosine and 3-phosphoinositide; Dual adaptor of phosphotyrosine and 3 phosphoinositides; hDAPP1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 淋巴細(xì)胞 b-淋巴細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 32kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DAPP1/BAM32
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是B淋巴細(xì)胞銜接分子DAPP1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
GPR35(G-protein coupled receptor 35) ELISA Kit>98.5%,BR空腸彎曲菌試劑盒
GPR58/TAAR2 ELISA KitHPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品空腸彎曲菌試劑盒
GPR50 ELISA Kit>98%,BR克雷白氏桿菌試劑盒
GPR105 ELISA Kit含量測(cè)定克拉拉細(xì)胞蛋白試劑盒
GPR81 ELISA Kit>98.5%,BR可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體試劑盒
GPR107 ELISA Kit>98.5%,BR可溶性腫瘤壞死因子受體2試劑盒
GPR108 ELISA KitHPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒
GPR116(G-protein coupled receptor 116) ELISA Kit≥98%,選擇性的PARP1/2抑制劑可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物試劑盒
GPR123 ELISA Kit>98.0%,BR可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒
GP repeat ELISA Kit單酯含量大于40%可溶性胸苷激酶1試劑盒
GPAA1 ELISA Kit純度≥50%,油狀液體可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1試劑盒
GPATCH2 ELISA Kit>95.0%,BR可溶性間皮素相關(guān)肽試劑盒
GPBP1 ELISA Kit>95.0%,BR可溶性核因子κB受體活化因子試劑盒
GPATCH4(G patch domain-containing protein 4) ELISA Kit>98%,BR,單水合物可溶性淀粉酶前體蛋白α試劑盒
GTF2A2 ELISA Kit>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)可溶性彈性蛋白片段試劑盒
GTF2E1 ELISA KitHPLC>98.5%,標(biāo)準(zhǔn)品可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9 elisa試劑盒
GTF2F1 ELISA Kit>99%可溶性白介素7受體試劑盒
GSG1L ELISA Kit>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品可溶性P選擇素試劑盒
B淋巴細(xì)胞銜接分子DAPP1抗體 Alternaria solani種屬:Alternaria solani
形態(tài)菌絲體全部埋生或部分表身生。菌絲無(wú)色至褐色。很少形成子座,無(wú)剛毛及附屬枝。分生孢子梗淡褐色至褐色,單枝或不規(guī)則分枝,短或長(zhǎng),彎曲或呈屈膝狀。產(chǎn)孢細(xì)胞孔出式產(chǎn)孢,合軸式延伸或不再延伸,孢痕明顯。分生孢子呈鏈狀或單生,淡褐色至深褐色,形狀不一,表面光滑或具微刺,有縱橫隔膜,頂端常具喙。菌絲有隔膜和分枝,較老的顏色較深。分生孢子梗直立或稍彎曲,色深而短,單生或叢生,有1-7個(gè)隔膜,大小為50-90um ×6-9um.分生孢子自分生抱子梗頂端產(chǎn)生,通常單生,其形狀差異很大,倒棍棒形至長(zhǎng)橢圓形,顏色為淡金黃色至欖褐色,具長(zhǎng)嚎,表面光滑,9-11個(gè)橫隔膜,0到數(shù)個(gè)縱隔膜,大小為117-154um ×9.8-15.7um,嚎長(zhǎng)等于或長(zhǎng)于孢身,有時(shí)有分枝,嚎寬2. 5-5um。
分離基物:番茄葉片
提供形式:凍干粉
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:教學(xué)科研
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。
生長(zhǎng)條件:25-28℃,好氧。
存儲(chǔ)條件:2-8℃。茄鏈格孢(番茄早疫病菌)(斜面)