標本要求 :
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
以下是產品參數規(guī)格:
產品名稱
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大鼠TNFαⅠRELISA試劑盒
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英文名稱
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Rat TNFα IR ELISA Kit
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貨號
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A108396
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試劑盒規(guī)格:96T/48T
試劑盒說明書:48孔配置一份/96孔配置一份
種屬:人、大鼠、小鼠、兔、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等,多年專業(yè)酶免服務,質量保證,產品僅用于科研免費提供代測服務。
操作步驟:
1)標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2)加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4)配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6)加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7)溫育:操作同3。
8)洗滌:產品僅用于科研操作同5。
9)顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10)終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11)測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
用途 :
大鼠TNFαⅠRELISA試劑盒僅供科研使用,定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中大腸桿菌宿主殘留蛋白的含量。
原理:
采用競爭法測定大腸桿菌宿主殘留蛋白水平。用大腸桿菌宿主殘留蛋白抗原包被微孔板,制成固相載體,實驗 時依次在微孔板中加入標本及標準品,并加入 HRP 標記的抗體,標本及標準品中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與 固相抗原結合。反復洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉化為藍色,再用硫酸終止反應,轉變成黃色。
標本中抗體量越多,結合在固相上的酶標抗體愈少,顏色越淺。顏色的深淺和樣品中的含量呈負相關。采用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度(OD 值),根據標準曲線,計算測試樣品中濃度。
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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關鍵字: 大鼠TNFαⅠRELISA試劑盒;Rat TNFα IR ELISA Ki;ELISA試劑盒;ELISA檢測試劑盒;ELISA酶聯免疫試劑盒;
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