抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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肌鈣集蛋白/收鈣素抗體
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英文名稱
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Anti-Calsequestrin
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-Calsequestrin
中文名稱 肌鈣集蛋白/收鈣素抗體
別 名 CASQ; Calsequestrin 1; Calsequestrin 1 fast twitch skeletal muscle; Calsequestrin 2; Calsequestrin 2 fast twitch cardiac muscle; Calsequestrin cardiac muscle isoform; Calsequestrin skeletal muscle isoform; Cardiac calsequestrin 2; CASQ 1; CASQ 2; PDIB1; PDIB2; Skeletal muscle calsequestrin 1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 結(jié)合蛋白 線粒體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 40kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Calsequestrin
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是肌鈣集蛋白/收鈣素抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
脫落(高純) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:98%,BR純度:95%
脫落,S誘抗素; 壯芽靈 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:95%,BR純度:≥98%
胃蛋白酶(1:3000) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:1:3000,BR純度:95%
核糖核酶A(sigma) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥50 U/mg,sigma 原裝純度:≥98%
S4 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%純度:≥98%
胃蛋白酶(1:12000) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:1:12000,BR純度:≥98%
蛋白酶K(進(jìn)分) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma分裝純度:≥97%
蛋白酶K(Sigma) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma原裝純度:97%
胰凝乳蛋白酶抑制劑 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:進(jìn)分純度:97%
亮抑蛋白酶肽(進(jìn)口) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥95%,進(jìn)口半純度:95%
胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥90%,進(jìn)分純度:≥98%
巖藻糖;L巖藻糖 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥99%,BR純度:≥98%
果膠酶 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:3萬U/g純度:≥98%
β淀粉酶(70萬u/ml液體) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,70萬u/ml液體純度:≥98.0%
β淀粉酶(酶活5萬粉末) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,酶活5萬,粉末純度:≥97%
DNA酶,脫氧核糖核酶Ⅰ 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥2000KU/mg protein,(牛胰)純度:≥97%
Relaxin 1 松弛肽/松弛素一抗 特價促銷 0.2ml 1Aminohydantoin Hydrochloride
Renalase 腎酶一抗 特價促銷 0.2ml ACTH (124), human
SLC12A3/NCCT 鈉離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白一抗 特價促銷 0.2ml Bradykinin
VNN1 血管非炎癥分子1一抗 特價促銷 0.2ml Bradykinin acetate
AXUD1 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白3一抗(半胱氨和絲氨富含核蛋白1) 特價促銷 0.2ml αMSH
BS69/Adenovirus 5 E1A binding protein 腺病毒5結(jié)合蛋白BS69一抗(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1) 特價促銷 0.2ml Endothelin1, human,porcine
BTG3 高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3一抗 特價促銷 0.2ml Bombesin
BTG4 B細(xì)胞遷移基因4一抗 特價促銷 0.2ml VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)
小鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Alanine Aminotransferase,ALT/GPT ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse malondialchehyche,MDA ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse pyruvate kinase,PK ELISA Kit特價促銷
小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Pyruvate Kinase,M2-PK ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1) ELISA試劑盒英文名稱:Mouse pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 ELISA Kit特價供應(yīng)
小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Complement 1 inhibitor autoantibody,C1INH ELISA Kit特價促銷人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒 組裝/原裝
人中期因子(MK)ELISA試劑盒 組裝/原裝
人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒 組裝/原裝
人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒 組裝/原裝
肌鈣集蛋白/收鈣素抗體 Alternaria tenuissima (Kunze) Wiltshire種屬:Alternaria tenuissima (Kunze) Wiltshire
分離基物:植物/棗/果實(shí)
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
生長條件:25℃,好氧
存儲條件:定期移植法細(xì)極鏈格孢(斜面)