抗體反應特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結合;
2.產品僅用于科研可逆性:抗原與抗體結合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。
1號染色體開放閱讀框177抗體 別 名 Chromosome 1 open reading frame 177; FLJ40201; Hypothetical protein LOC163747; Uncharacterized protein C1orf177; CA177_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat
產品類型 一抗
英文名稱 Anti-C1orf177
中文名稱 1號染色體開放閱讀框177抗體
研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 神經生物學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 48kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C1orf177
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
抗體反應的因素:
1.電解質 :抗原抗體特異結合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質影響,如有適當濃度的電解質存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現明顯的凝集或沉淀現象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應最適溫度。
含試劑:
1、一抗(應用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、產品僅用于科研如果需要,可進行復染,脫水,透明。
14、選擇適當的封片劑封片。
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
無水乙鈉 進口/國產 規(guī)格:>99%,分子生物學級純度:>95%
低熔點瓊脂糖;具有低凝膠溫度的瓊脂糖 進口/國產 規(guī)格:BR;具有低凝膠溫度純度:>95%
無水二鉀 進口/國產 規(guī)格:>99%,分子生物學級純度:>95%
6芐氨基嘌呤 進口/國產 規(guī)格:>99%純度:>95%
純水(HPLC grade) 進口/國產 規(guī)格:HPLC grade純度:>95%
馬來,順丁二 進口/國產 規(guī)格:AR,HPLC>99%純度:>95%
銨 進口/國產 規(guī)格:>99%,分子生物學級純度:>95%
化銫 進口/國產 規(guī)格:>99%,分子生物學級純度:>95%
二鈉七水 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
dATP溶液(100 mM) 進口/國產 規(guī)格:>97%,BR純度:>95%
癸鈉 進口/國產 規(guī)格:>99%,進分純度:>90%
瓊脂糖(美侖電泳級) 進口/國產 規(guī)格:美侖,電泳級純度:>95%
瓊脂糖(Sigma) 進口/國產 規(guī)格:Sigma原裝純度:>95%
植物血凝素 進口/國產 規(guī)格:BR純度:>95%
6糠基氨基嘌呤,激動素 進口/國產 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
乙二雙(2氨基乙基)四乙 進口/國產 規(guī)格:>98%,分子生物學級純度:>95%
FAS/Apo1/CD95 載脂蛋白1一抗 特價促銷 0.1ml Flufenamic acid
CPE 胰羧肽酶E一抗 特價促銷 0.2ml Flumazenil
Myotilin 肌收縮蛋白MYOT一抗 特價促銷 0.1ml Flumazenil
PMCA 細胞膜鈣轉運ATP酶一抗 特價促銷 0.2ml Fluoxetine Hydrochloride
GABRA3/GABA A Receptor alpha 3 G氨基受體α3一抗 特價促銷 0.2ml Fluoxetine Hydrochloride
NCEH/AADACL1 中性膽固水解酶1一抗 特價促銷 0.2ml Fluvoxamine maleate
Rab25 癌基因RAS相關蛋白Rab25一抗 特價促銷 0.2ml Fluvoxamine maleate
Testis 腫瘤抑制基因Testin一抗 特價促銷 0.2ml Formestane
兔肝實質細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔肝外膽管上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔肝星狀細胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔睪丸支持細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔骨骼肌成纖維細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔骨骼肌細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
1號染色體開放閱讀框177抗體 Ganoderma│applanatum (Pers.) Pat.種屬:Ganoderma│applanatum (Pers.) Pat.
分離基物:倒木
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:14
生長條件:25
存儲條件:液氮超低溫凍結法;定期移植法扁芝