抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
鈣調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體 別 名 calmodulin regulated spectrin-associated protein 1; Calmodulin-regulated spectrin-associated protein 1; CAMP1_HUMAN; camsap1; PRO2405.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-CAMSAP1
中文名稱 鈣調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 干細(xì)胞 跨膜蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 178kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CAMSAP1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
Rat bradykinin,BK ELISA試劑盒Rosuvastatin>97%,游離酸
Rat Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA試劑盒Sudan I/Solvent Yellow 14BS生物染色級
Rat brain natriuretic peptide,BNP ELISA試劑盒Sudan II /Solvent Orange 7BS
Rat brain-gut peptides,BGP/Gehrelin ELISA試劑盒 Sudan3BS
Rat Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA試劑盒 Sudan IV/Solvent Red 24BS
Rat calcineurin,CaN ELISA試劑盒 Oil red O/Solvent Red 27 BS
Rat calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA試劑盒Sudan red G/Solvent Red 1BS
Rat Calcitonin,CT ELISA試劑盒Sudan Black B /Solvent Black 3BS(生物染色)
Rat calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ,CAMK 2 ELISA試劑盒Sudan Black B /Solvent Black 3BS(生物染色)
Rat Calf Intestine Alkaline Phosphatase,CIAP ELISA試劑盒Sudan Red B/Solvent Red 25AR
Rat calmodulin,CAM ELISA試劑盒 Sudan Red 7B/Solvent Red 19BS
Rat Calretinin,CR ELISA試劑盒Sudan Blue II/Solvent Blue 35BS
Rat carbohydrate-deficient transferrin,CDT ELISA試劑盒Acridine Orange hemi(zinc chloride) saltBS,電泳級
Rat carbonic anhydrase 2,CA-2 ELISA試劑盒 Methyl redIND
Rat carbonic anhydrase,CA ELISA試劑盒Methyl redIND
人膠質(zhì)瘤細(xì)胞,SHG-44細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人膠質(zhì)瘤細(xì)胞,SNB-19細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤,T98G細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人結(jié)腸癌細(xì)胞,Caco-2細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人結(jié)腸癌細(xì)胞,COLO205細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人結(jié)腸癌細(xì)胞,CW2細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
鈣調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體 Rhodotorulaminuta(Saito)Harrison種屬:Rhodotorulaminuta(Saito)Harrison
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:13
生長條件:25-28℃小紅酵母