抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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促凋亡BNIP3L蛋白抗體
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英文名稱
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Anti-BNIP3L
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-BNIP3L
中文名稱 促凋亡BNIP3L蛋白抗體
別 名 Adenovirus E1B19k binding protein B5; Adenovirus E1B19K-binding protein B5; BCL2/adenovirus E1B 19 kd protein interacting protein 3a; BCL2/adenovirus E1B 19 kDa protein interacting protein 3A; BCL2/adenovirus E1B 19 kDa protein-interacting protein 3-like; BCL2/adenovirus E1B 19 kDa protein-interacting protein 3A; BCL2/adenovirus E1B 19kDa interacting protein 3 like; BNI3L_HUMAN; BNIP3a; BNIP3H; BNIP3L; BNIP3L protein; NIP3 like protein X; NIP3-like protein X; NIP3L; NIX.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學 細胞凋亡 線粒體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 24kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BNIP3L.
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是促凋亡BNIP3L蛋白抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
卡替洛爾(標準品) 英文名稱(EN):Bromocresol Green (Dye content 95%)規(guī)格(SP):1G
可樂定 英文名稱(EN):BisBenzimide H 33342 (for fluorescence...規(guī)格(SP):25MG
可樂定(標準品) 英文名稱(EN):BisBenzimide H 33258 (for fluorescence...規(guī)格(SP):25MG
克林素 英文名稱(EN):Basic Fuchsin (for microscopy, indicat...規(guī)格(SP):5G
克林素(標準品) 英文名稱(EN):Auramine O (Dye content, ≥85%)規(guī)格(SP):10G
克林素棕櫚 英文名稱(EN):Naphthol Blue Black (for electrophores...規(guī)格(SP):5G
喹普利(標準品) 英文名稱(EN):Acridine Orange hemi(zinc chloride), 80%規(guī)格(SP):10G
拉貝洛爾(標準品) 英文名稱(EN):N,N,N',N'TetramethylO(Nsuccinimidy...規(guī)格(SP):1G
鑭六水(>99%,BR) 英文名稱(EN):TDBTU (HPLC,≥95.0%)規(guī)格(SP):1G
酪 英文名稱(EN):tertButyl(chloro)dimethylsilane (TBDM...規(guī)格(SP):5G
雷洛昔芬 英文名稱(EN):TATU規(guī)格(SP):5G
雷莫司瓊 英文名稱(EN):Methyl cellulose (viscosity 4000cP)規(guī)格(SP):100G
雷莫司瓊(標準品) 英文名稱(EN):Methyl cellulose (viscosity 1,500cP)規(guī)格(SP):100G
雷尼替 英文名稱(EN):Methyl cellulose (viscosity 400cP)規(guī)格(SP):100G
雷尼替(標準品) 英文名稱(EN):Percoll規(guī)格(SP):25ML
利多卡因 英文名稱(EN):Ficoll PM 400規(guī)格(SP):10G
利多卡因(標準品) 英文名稱(EN):Ficoll PM 70規(guī)格(SP):10G
利托君 英文名稱(EN):Blue Dextran 2000規(guī)格(SP):1G
T細胞2識別黑色素瘤抗原抗體14-Deoxy-11-hydroxyandrographolide中文名:別名:分子式:C20H30O5
肝細胞癌HHCM蛋白抗體Paclitaxel中文名:紫杉醇別名:Taxol分子式:C47H51NO14
紫外切除修復蛋白RAD23A抗體Elliotinol中文名:別名:trans-Communol分子式:C20H32O
紫外切除修復蛋白RAD23B抗體Labd-13(E)-ene-8α,15-diol中文名:別名:分子式:C20H36O2
3-羥基異丁酸脫氫酶抗體18-Nor-4,15-dihydroxyabieta-8,11,13-trien-7-one中文名:別名:分子式:C19H26O3
促凋亡BNIP3L蛋白抗體 Aureobasidiumpullulans種屬:Aureobasidiumpullulans
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L,葡萄糖20.0g,瓊脂15.0g,pH自然。[注]馬鈴薯提取液
生長條件:25-28℃;好氧
存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法出芽短梗霉