"HMCB Cells|人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
BJA-B細胞系相關產(chǎn)品：Y3Ag1.2.3細胞、NE-1細胞、BC-020細胞
HSC（Human Schwann）細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞
RPMI-2650細胞系相關產(chǎn)品：BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞
細胞生長：貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
HMCB Cells|人黑色素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
CL-34細胞系相關產(chǎn)品：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
hEM15A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
SCC-9細胞系相關產(chǎn)品：Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞
T/GHA-VSMC細胞系相關產(chǎn)品：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞
細胞傳代方法：１：６—１：１０傳代，２天換液１次
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟：１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２-５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２-３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HMCB Cells|人黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
Panc05.04細胞系相關產(chǎn)品：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
G-Olig2細胞系相關產(chǎn)品：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
NCIH520細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
NCI-H524細胞系相關產(chǎn)品：DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
D341細胞系相關產(chǎn)品：hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
SKRC-42細胞系相關產(chǎn)品：H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞
HFL細胞系相關產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
SKNDZ細胞系相關產(chǎn)品：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
Nb-2細胞系相關產(chǎn)品：C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞
SMA-560細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
3-LL細胞系相關產(chǎn)品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
Ramos-RA1細胞系相關產(chǎn)品：H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
HMCB Cells|人黑色素瘤細胞系
HRVEC細胞系相關產(chǎn)品：CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
C42細胞系相關產(chǎn)品：LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
T98G細胞系相關產(chǎn)品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
SNGM細胞系相關產(chǎn)品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
Dunn LM8細胞系相關產(chǎn)品：343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞
CAMA-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
253J B-V細胞系相關產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
253JB-V細胞系相關產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
253JB-V細胞系相關產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
Y1細胞系相關產(chǎn)品：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
Normal fibroblast-10細胞系相關產(chǎn)品：58F細胞、PNT1A細胞、JVM-2細胞
BA/F3細胞系相關產(chǎn)品：DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞
16HBE14o-細胞系相關產(chǎn)品：Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞
Kasumi-6細胞系相關產(chǎn)品：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
NCIH2066細胞系相關產(chǎn)品：CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞
NCI-H661細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞
H1404細胞系相關產(chǎn)品：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
8226細胞系相關產(chǎn)品：HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
SK ES 01細胞系相關產(chǎn)品：MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
CSQT-2細胞系相關產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
Hs68細胞系相關產(chǎn)品：DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞
KM.12細胞系相關產(chǎn)品：HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
L-5178-Y-R細胞系相關產(chǎn)品：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
C33細胞系相關產(chǎn)品：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
CL MC/9細胞系相關產(chǎn)品：HFL 1細胞、Walker256-TC細胞、NOR-10細胞
H716細胞系相關產(chǎn)品：Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞
KRC-Y細胞系相關產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
TE-1細胞系相關產(chǎn)品：OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞
HD11細胞系相關產(chǎn)品：GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞
SW 1573細胞系相關產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
SKHEP-1細胞系相關產(chǎn)品：SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
MV 3細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞
CCRF-SB細胞系相關產(chǎn)品：RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞
A-431細胞系相關產(chǎn)品：RL95-2細胞、Raji細胞、SKBR-3細胞
MG-HU-3細胞系相關產(chǎn)品：TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞
KLM-1細胞系相關產(chǎn)品：RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞
Hs940-T細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞
NBL-3細胞系相關產(chǎn)品：RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞
AN-3細胞系相關產(chǎn)品：U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
BNL CL2細胞系相關產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
HEL299細胞系相關產(chǎn)品：SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
GM2219C細胞系相關產(chǎn)品：AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
hTERT-RPE-1細胞系相關產(chǎn)品：SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞
H-69細胞系相關產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
NT-2細胞系相關產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
NCI-H727細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
Kit 225細胞系相關產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
HIMEC細胞系相關產(chǎn)品：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
Y3M細胞系相關產(chǎn)品：HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
TMD8細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
HMCB Cells|人黑色素瘤細胞系
TE10細胞系相關產(chǎn)品：V-79-4細胞、NCI-H526細胞、Jurkat FHCRC細胞
NCIH727細胞系相關產(chǎn)品：NCI-N87細胞、NCI-H1882細胞、COV434細胞
HFLS細胞系相關產(chǎn)品：MPC11細胞、Panc05.04細胞、Panc813細胞
PC-3細胞系相關產(chǎn)品：LS180細胞、RC-2細胞、Jurkat E6-1細胞
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