抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白BACH2抗體
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英文名稱
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Anti-BACH2
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-BACH2
中文名稱 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白BACH2抗體
別 名 Bach 2; Bach2; BACH2_HUMAN; Basic leucine zipper transcription factor 2; BTB and CNC homolog 2; BTB and CNC homology 1 basic leucine zipper transcription factor 2; OTTHUMP00000016867; OTTHUMP00000016868; OTTHUMP00000040591; Transcription regulator protein BACH2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 淋巴細(xì)胞 b-淋巴細(xì)胞 新陳代謝
蛋白分子量 predicted molecular weight: 92kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BACH2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白BACH2抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
吐溫80(細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)) 英文名稱(EN):Polyphyllin II (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
吐溫80(藥用級(jí)) 英文名稱(EN):Polyphyllin C (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
釷試劑 英文名稱(EN):Polyphyllin E (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
蛻皮激素(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):Polyphyllin F (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
褪黑素,松果體素 英文名稱(EN):Null規(guī)格(SP):20MG
褪黑素,松果體素(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):Polyphyllin F (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
褪黑素d4 英文名稱(EN):Helicid (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
托卡(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):(?)Huperzine A (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
托 英文名稱(EN):Nobiletin (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
托(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):Null規(guī)格(SP):20MG
托d12 英文名稱(EN):Qingyangshengenin A (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
托伐普坦 英文名稱(EN):Qingyangshengenin B (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
托法替尼;CP90550 英文名稱(EN):Polyphyllin D (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
托芬(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):Eriocitrin (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
托可索侖/維生素E聚二琥珀 英文名稱(EN):Bulleyaconitine A (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
托拉塞米 英文名稱(EN):Secoisolariciresinol Diglucoside (≥9...規(guī)格(SP):20MG
托拉塞米(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):αmangostin (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
托 英文名稱(EN):Cichoric Acid (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
3-磷酸甘油醛脫氫酶(兔來源免疫組化用抗體)Bruceine D中文名:鴉膽子素D別名:分子式:C20H26O9
胃泌素/蛙皮素抗體Yadanziolide B中文名:鴉膽子內(nèi)酯B別名:分子式:C20H26O11
膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體Yadanzioside G中文名:鴉膽子苷G別名:分子式:C36H48O18
G蛋白偶聯(lián)受體49抗體Dehydrobruceine A中文名:去氫鴉膽子素A別名:Dehydrobrucein A分子式:C26H32O11
G蛋白偶聯(lián)受體γ4抗體Bruceine E中文名:鴉膽子素E別名:Brucein E; 鴉膽子苦素E分子式:C20H28O9
轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白BACH2抗體 Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn種屬:Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn
提供形式:凍干粉
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件:30℃,好氧枯草芽孢桿菌