"NCI-H650 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HT(H9)細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
TE4細胞系相關產(chǎn)品:RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
Dami細胞系相關產(chǎn)品:H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞
細胞生長:貼壁
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
NCI-H650 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
Hs 578.T細胞系相關產(chǎn)品:OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
H211細胞系相關產(chǎn)品:UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
T98 G細胞系相關產(chǎn)品:Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
Y1細胞系相關產(chǎn)品:CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2-3d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H650 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性:懸浮生長
TE8細胞系相關產(chǎn)品:RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
COLO 824細胞系相關產(chǎn)品:KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
CEM-C7細胞系相關產(chǎn)品:CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞
EOMA細胞系相關產(chǎn)品:P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
COV434細胞系相關產(chǎn)品:SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞
373MG細胞系相關產(chǎn)品:624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
A 375細胞系相關產(chǎn)品:Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
SMMC7721細胞系相關產(chǎn)品:CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞
F-81細胞系相關產(chǎn)品:BIC細胞、WM266細胞、X63細胞
HCC-366細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞
MES-SA細胞系相關產(chǎn)品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞
alphaTC clone 6細胞系相關產(chǎn)品:L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
NCI-H650 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
MFD-1細胞系相關產(chǎn)品:LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
CL1-5細胞系相關產(chǎn)品:HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
H-889細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
SNU668細胞系相關產(chǎn)品:Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
MGC803細胞系相關產(chǎn)品:A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
RPMI-1846細胞系相關產(chǎn)品:Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
AMO1細胞系相關產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
HSF細胞系相關產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
HSF細胞系相關產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
HEL 299細胞系相關產(chǎn)品:H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
NCI-H209細胞系相關產(chǎn)品:RA.1細胞、H1693細胞、KBM-7細胞
AGS細胞系相關產(chǎn)品:Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
HCC0044細胞系相關產(chǎn)品:C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
L cell line細胞系相關產(chǎn)品:IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
NCIH1155細胞系相關產(chǎn)品:LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞
CHP-212細胞系相關產(chǎn)品:RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
PL12細胞系相關產(chǎn)品:16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
Panc_03_27細胞系相關產(chǎn)品:A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
SK HEP 01細胞系相關產(chǎn)品:HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
CTLL2細胞系相關產(chǎn)品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞
DLD1細胞系相關產(chǎn)品:AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
IGROV 1細胞系相關產(chǎn)品:HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
MRC-V細胞系相關產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞
H-1915細胞系相關產(chǎn)品:S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
MDA-MB-468-RED細胞系相關產(chǎn)品:GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
SU8686細胞系相關產(chǎn)品:BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞
HMO6細胞系相關產(chǎn)品:NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
293c18細胞系相關產(chǎn)品:NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
MHCC-97細胞系相關產(chǎn)品:U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
H1385細胞系相關產(chǎn)品:MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
beta-TC6細胞系相關產(chǎn)品:BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
H1385細胞系相關產(chǎn)品:MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
H-2330細胞系相關產(chǎn)品:Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
MCF10-A細胞系相關產(chǎn)品:ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞
H-660細胞系相關產(chǎn)品:P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞
A2780CP70細胞系相關產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
NCIH1568細胞系相關產(chǎn)品:THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
NCIH1568細胞系相關產(chǎn)品:THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
Mono Mac6細胞系相關產(chǎn)品:138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
HCe-8693細胞系相關產(chǎn)品:MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
HCASMC細胞系相關產(chǎn)品:NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
Human Embryonic Kidney 293細胞系相關產(chǎn)品:My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品:GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關產(chǎn)品:OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
H711細胞系相關產(chǎn)品:IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
Ramos(RA1)細胞系相關產(chǎn)品:IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞
OCILY3細胞系相關產(chǎn)品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
D341細胞系相關產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
CA922細胞系相關產(chǎn)品:MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
2V6.11細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
CF PAC-1細胞系相關產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
NCI-H650 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
CAKI 1細胞系相關產(chǎn)品:OCI Ly10細胞、Microbiological Associates-104細胞、HuTu 80細胞
SNUC2A細胞系相關產(chǎn)品:A 549細胞、OsACL細胞、Panc-1-P細胞
A 375細胞系相關產(chǎn)品:Hs 746T細胞、SN4741細胞、KBM-7細胞
LTEP a2細胞系相關產(chǎn)品:RSC-364細胞、PLA-801D細胞、D-283 Med細胞
"