"769-P Cells|人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞系1975年建系,源自一位63歲白人女性的初期透明細(xì)胞腺癌組織,細(xì)胞呈圓形且邊界不清,核漿比大,有微絨毛及橋粒。該細(xì)胞可在軟瓊脂上生長。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞
HepG2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、JKT1細(xì)胞
HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
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細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
Cates 1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP2細(xì)胞、67NR細(xì)胞、A549細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:4—1:12傳代,2—3天換液一次
以下對初次培養(yǎng)細(xì)胞人員來說,是非常好的開門教程:準(zhǔn)備室的設(shè)備:單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲(chǔ)品柜(放置未消毒物品)、儲(chǔ)品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺(tái);配液室的設(shè)備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(jì)(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液);培養(yǎng)室的設(shè)備:液氮罐、儲(chǔ)品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(tái)(書寫實(shí)驗(yàn)記錄);必須放在無菌間的設(shè)備:離心機(jī)(收集細(xì)胞)、超凈工作臺(tái)、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無菌室的滅菌:定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺(tái)等,然后用3‰來蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外燈照射;實(shí)驗(yàn)前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘;實(shí)驗(yàn)后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺(tái)、邊臺(tái)、倒置顯微鏡的載物臺(tái);實(shí)驗(yàn)人員的無菌準(zhǔn)備:肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦凈雙手。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
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細(xì)胞生長特性:貼壁生長
GA-10(Clone 4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERTHME1細(xì)胞、UCH1細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
NCIH748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞
NCI-H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rh30細(xì)胞、H-660細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞
D283-MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞
MM1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-1210細(xì)胞、FAT細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞
Hs 578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細(xì)胞、F98細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞
HEK293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞
GM16136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM1細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞
COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞
HEY A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、CMK細(xì)胞
769-P Cells|人腎癌細(xì)胞系
GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
IPEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2C細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、Mel526細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC366細(xì)胞、CG4細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞
NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞
NCIH548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA435細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞、C17.2細(xì)胞
OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞
SV-HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD-293細(xì)胞、231-luc細(xì)胞、NCM356細(xì)胞
SV40-HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞
FL-83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW954細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞、MDA175細(xì)胞
H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293FT細(xì)胞、B16F0細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞
HS-766-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞
WM-239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 410細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞
H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8402細(xì)胞、TE-10細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞
Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞
L929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1792細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞
Mv 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞
HUT-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
MFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-L1細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞
T-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 39細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞
CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞
BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kupffer細(xì)胞、Y1細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞
COLO-679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞
RPMI 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞
M20 [Human melanoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞
Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
C6661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-8細(xì)胞、THLE-3細(xì)胞、NS1細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞
AML12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3-E1細(xì)胞、PIG3細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞
GM01232E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞
NCI-H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞、KG-1細(xì)胞
CNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞、ECV細(xì)胞
786-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH716細(xì)胞、TOG細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞
A2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsACL細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
VP 267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞、GM03190細(xì)胞
CNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞
Jurkat E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-2細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞
Jurkat E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-2細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞
HMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞、GM2132細(xì)胞
NCI-H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22細(xì)胞、JG細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞
HGF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAN 02細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞
118 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE3細(xì)胞、LK-2細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞
MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞
Hs-281-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞
769-P Cells|人腎癌細(xì)胞系
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、H526細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me-Wo細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞
MM1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-1210細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、KM-12細(xì)胞
B16F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y 1細(xì)胞、159PT細(xì)胞、U2932細(xì)胞
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