抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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血管緊張素Ⅱ受體1抗體
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英文名稱(chēng)
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Anti-AT2R
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱(chēng) Anti-AT2R
中文名稱(chēng) 血管緊張素Ⅱ受體1抗體
別 名 AG2S; Agtr 1; Agtr1; AGTR1_HUMAN; Agtr1a; AGTR1B; Ang II; Angiotensin II receptor type 1; Angiotensin II type 1 receptor; Angiotensin II type-1 receptor; Angiotensin receptor 1; Angiotensin receptor 1B; AT 1B; AT 1r; AT-1B; AT-1r; AT1; At1a; AT1AR; AT1B; AT1BR; AT1R; AT2R1; AT2R1A; AT2R1B; HAT1R; Type 1 angiotensin II receptor; Type 1B angiotensin II receptor; Type-1 angiotensin II receptor.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 血管內(nèi)皮細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 41kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AT2R C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是血管緊張素Ⅱ受體1抗體 的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品:
多西他賽系統(tǒng)適用性鑒別溶液 15mg標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱(chēng):
多庫(kù)酯相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:40mg 英文名稱(chēng):
磺多拉司瓊相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱(chēng):
曲唑三硅氧相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:150mg 英文名稱(chēng):
曲唑三硅氧相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱(chēng):
曲唑三硅氧相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:150mg 英文名稱(chēng):
依莰舒相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱(chēng):Ecamsule Related Compound E
依莰舒相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱(chēng):Ecamsule Related Compound F
依莰舒相關(guān)物質(zhì)G標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱(chēng):Ecamsule Related Compound G
恩曲他濱系統(tǒng)適用性混合物A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱(chēng):
羥基尿素 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Hydroxyurea 含量:BR,99%
羥基甾族合物氧還原酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) HSD 含量:BR,5u/ul,99%
羥基樹(shù)脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Hydroxymethylresin 含量:BR
鞘酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Sphingomyelin 含量:BR,98%
親和素 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Avidin(chikeneggwhite) 含量:BR,0.1u/mg
青G 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) PenicillinGPotassiumsalt 含量:BR,98%
青G 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) PenicillinGNasalt 含量:寡肽級(jí),90%
青鏈兩性B溶液 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Penicillin&Streptomycin&AmphotericinBsolution,γIrradiated 含量:高純,90%,適合電泳
青鏈溶液 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Penicillin&Streptomycinsolution,γIrradiated 含量:金標(biāo)級(jí),99%,可做金標(biāo)一抗
青鏈新溶液 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Penicillin&Streptomycin&Neomycinsolution,γIrradiated 含量:BR,80%
G蛋白γ2抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白γ2抗體Jacaranone中文名:別名:分子式:C9H10O4
G蛋白αS抗體(鳥(niǎo)嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白Gα s)3-Hydroxychimaphilin中文名:3-羥基梅笠草素別名:分子式:C12H10O3
G蛋白β4抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白β亞基4Chimaphilin中文名:梅笠草素別名:2,7-Dimethyl-1,4-naphthoquinone分子式:C12H10O2
G蛋白β2抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白β亞基2Prerubialatin中文名:別名:分子式:C27H20O7
G蛋白偶聯(lián)受體GPR92蛋白抗體(S)-4-Methoxydalbergione中文名:(S)-4-甲氧基黃檀醌別名:(-)-4-Methoxydalbergione分子式:C16H14O3
血管緊張素Ⅱ受體1抗體 Klebsiella oxytoca種屬:Klebsiella oxytoca
分離基物:鹵制品
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件:37℃,好氧
存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法產(chǎn)酸克雷伯氏菌