抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體
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英文名稱
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Anti-AAK1
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-AAK1
中文名稱 AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體
別 名 AAK 1; Adaptor associated kinase 1; Aak1; AAK1_HUMAN; Adaptor-associated kinase 1; AP2-associated protein kinase 1; DKFZp686F03202; AP2 associated kinase 1;AP2 associated protein kinase 1; DKFZp686F03202; DKFZp686K16132; FLJ23712; FLJ25931; FLJ31060; FLJ42882; FLJ45252; KIAA1048; MGC138170; MGC164568; MGC164570.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 104kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AAK1 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
地布卡因標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Dibucaine Hydrochloride
標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1ml 英文名稱:Phenylethyl Alcohol
氧酰酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Ethopabate
蝶呤標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Methotrexate
DLα生育標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:250mg 英文名稱:
硬脂標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Stearic Acid
棕櫚標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Palmitic Acid
氫加蘭他敏標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Galantamine Hydrobromide
潑尼松標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Prednisone
螺內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Spironolactone
咪芐西林 進(jìn)口、國產(chǎn) Azlocillinsodium 含量:USP級,40u/mg
糜蛋白酶原 進(jìn)口、國產(chǎn) ChymotrypsinogenA 含量:BR,10u/ul,液體
脒蚜 進(jìn)口、國產(chǎn) Imidacloprid 含量:BR,98%
蜜蠟 進(jìn)口、國產(chǎn) Beeswax,white 含量:BR,98%
棉藍(lán) 進(jìn)口、國產(chǎn) Methylblue 含量:IND
棉子糖 進(jìn)口、國產(chǎn) D(+)Raffinosepentahydrate 含量:BR,90%
末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶 進(jìn)口、國產(chǎn) TDT 含量:PCR級,600u/ml
莫能星 進(jìn)口、國產(chǎn) Monensinsodium 含量:BR,99%
莫西沙星 進(jìn)口、國產(chǎn) Moxifloxacin 含量:BR,10%
木寡糖 進(jìn)口、國產(chǎn) xylooligosaccharides 含量:高純,98%
糖原蛋白1抗體2-C-Methyl-D-erythritol中文名:2-C-甲基-D-赤蘚糖醇別名:分子式:C5H12O4
葡萄糖合成酶2抗體2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol中文名:別名:分子式:C8H16O4
谷草轉(zhuǎn)氨酶2抗體Linderaspirone A中文名:別名:分子式:C34H32O10
葡萄糖-6磷酸脫氫酶抗體2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester中文名:別名:Cerebronic acid ethyl ester分子式:C26H52O3
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5抗體Malic acid 4-Me ester中文名:別名:分子式:C5H8O5
AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體 Acidovorax│facilis種屬:Acidovorax│facilis
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:yes
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:A2
生長條件:30℃
存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法敏捷食酸菌