抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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自噬相關(guān)蛋白4B抗體
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英文名稱
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Anti-APG4B/AUTL1
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-APG4B/AUTL1
中文名稱 自噬相關(guān)蛋白4B抗體
別 名 APG4B; ATG4 autophagy related 4 homolog B (S. cerevisiae); AUT like 1 cysteine endopeptidase; AUTL1; Autophagin 1; Autophagy related cysteine endopeptidase 1; Autophagy related protein 4 homolog B; Cysteine protease ATG4B; hAPG4B; MGC1353br.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 44kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human APG4B N-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是自噬相關(guān)蛋白4B抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
竹桃三酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Troleandomycin
萜品標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:750mg 英文名稱:Terpin Hydrate
右旋那敏馬來標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Dexbrompheniramine Maleate
熒光素標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Fluorescein
羥唑啉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Oxymetazoline Hydrochloride
佐卡因標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Benzocaine
維拉帕米相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:150mg 英文名稱:Verapamil Related Compound F
愈創(chuàng)木標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Guaiacol
二標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Chloroxylenol
青V標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Penicillin V
馬尿酰組酰亮 進(jìn)口、國產(chǎn) NHippurylHisLeuhydrate 含量:BR,98%
嗎啉磺 進(jìn)口、國產(chǎn) MES 含量:IND
嗎啉磺 進(jìn)口、國產(chǎn) MESsodiumsalt 含量:BR
麥角甾 進(jìn)口、國產(chǎn) Ergosterol 含量:AR,99%
麥考 進(jìn)口、國產(chǎn) Mycophenolicacid 含量:BR
麥芽酶 進(jìn)口、國產(chǎn) MaltosePhosphorylase 含量:BR,120u/mg
麥芽糖糊精 進(jìn)口、國產(chǎn) Maltodextrin 含量:高純,95%
麥芽糖酶 進(jìn)口、國產(chǎn) γMDH 含量:BR,20u/ul
沒食子酯 進(jìn)口、國產(chǎn) Propylgallate 含量:BR
玫瑰紅B 進(jìn)口、國產(chǎn) RhodamineB 含量:BR,98%
核呼吸因子2抗體Arctinol B中文名:別名:分子式:C13H12O2S2
生殖細(xì)胞樣蛋白1樣蛋白抗體Fumaric acid中文名:別名:分子式:C4H4O4
γ1氨基丁酸受體GABAA Rβ1抗體Shikimic acid中文名:莽草酸別名:分子式:C7H10O5
干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體Echinoynethiophene A中文名:別名:分子式:C13H10O2S
磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體Allitol中文名:蒜糖醇別名:阿洛醇; Allodulcitol; allo-Hexitol分子式:C6H14O6
自噬相關(guān)蛋白4B抗體 Viridibacillusarenosi種屬:Viridibacillusarenosi
分離基物:土壤,荷蘭
安全等級:1
模式菌株:yes
應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:110
生長條件:30℃Viridibacillusarenosi