抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產品僅用于科研通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
參數規(guī)格:
產品名稱
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ANKLE2蛋白抗體
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英文名稱
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Anti-ANKLE2
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-ANKLE2
中文名稱 ANKLE2蛋白抗體
別 名 ANKL2_HUMAN; ANKLE 2; ANKLE2; ankyrin repeat and LEM domain containing 2; Ankyrin repeat and LEM domain-containing protein 2; LEM domain containing 7; LEMD 7; LEMD7.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產品類型 一抗
研究領域 細胞生物 免疫學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 104kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ANKLE2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標記技術:
(一)原理
產品僅用于科研當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
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三聚標準品 規(guī)格:250mg 英文名稱:
雷米普利相關物質D標準品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
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雷米普利相關物質A標準品 規(guī)格:30mg 英文名稱:
醋異酯標準品 規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱:Isopropyl Acetate
基異基標準品 規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱:Methyl Isobutyl Ketone
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鄰二羧二C810支鏈基酯 進口、國產 DINP 含量:AR,98%
鄰胂偶1,8二羥基3,6二磺 進口、國產 ArsenazoI 含量:BR,97
鄰 進口、國產 2'Fluoroacetophenone 含量:CP,98%
鄰茴香 進口、國產 oAnisaldehyde 含量:4N
鄰 進口、國產 oCresol 含量:CP,99%
鄰呋酞 進口、國產 oCresolphthalein 含量:IND
鄰紅 進口、國產 CresolRed 含量:高純
鄰磺酰酞 進口、國產 CresolRedsodiumsalt 含量:生物技術級,98%
鄰氧基 進口、國產 2Methoxybenzoicacid 含量:超純,99%
鄰 進口、國產 OCBA 含量:AR,98.5%
Rab5激活蛋白6抗體6-O-Feruloylglucose中文名:6-O-阿魏酰葡萄糖別名:分子式:C16H20O9
生長激素釋放因子受體抗體Arillatose B中文名:別名:6'-O-Feruloylsucrose分子式:C22H30O14
NuBI蛋白結合蛋白1抗體Catalponol methylthiomethyl ether中文名:別名:分子式:C17H22O2S
GSDML蛋白抗體Ethyl glucoside中文名:乙基葡萄糖苷別名:Ethyl β-D-glucopyranoside分子式:C8H16O6
AF350標記的磷酸化GATA結合蛋白2抗體3-Hydroxycatalponol中文名:別名:3,4-Dihydro-3,4-dihydroxy-2-(3-methyl-2-butenyl)-1(2H)-naphthalenone分子式:C15H18O3
ANKLE2蛋白抗體 Litorimicrobiumtaeanense種屬:Litorimicrobiumtaeanense
分離基物:沙灘沉積物
安全等級:1
模式菌株:yes
應用領域:模式菌株:
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:102
生長條件:25℃Litorimicrobiumtaeanense