"HCC202 Cells|人乳腺原發(fā)性導管癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
16-HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN60細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、IPLB-Sf21-AE細胞
JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
HEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞
細胞生長:貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
HCC202 Cells|人乳腺原發(fā)性導管癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
Hepa 1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞
HHUA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:1)CO2培養(yǎng)箱:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要;2)烘箱(干燥箱):用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時,烘箱內(nèi)溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好,缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應(yīng)鼓風與升溫同時開始,至100℃時,停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應(yīng)等溫度自然下降至100℃以下后可開門。3)超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。4)液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。5)超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。6)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。7離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。除上述儀器外,移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC202 Cells|人乳腺原發(fā)性導管癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
HuH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞
GA-10 clone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞
CL34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H128細胞、HASMC細胞、NCI-H1299細胞
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
FD-LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞
CD 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
MDAMB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞
SK-NM-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVSMC細胞、WM 2664細胞、SO-Rb 50細胞
OCI/AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
H-820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M IE8細胞、HNE-2細胞、Onda 11細胞
HCC202 Cells|人乳腺原發(fā)性導管癌細胞系
MCF7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
HepG2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
MIA PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
BV173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
Jurkat FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-1395細胞、KMY1022細胞、SNK6細胞
BHT101細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
SK-N-MC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
CL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
TCC Sup細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
PANC 327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
PLA802細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
RPMI #8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
EFM-192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞
3T3-442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞
HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
NCI-H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
A72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞
GM17346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞
NR-8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU4細胞、NK92細胞、HFL 1細胞
PLB 985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
FRhK4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞
bEnd.3[BEND3]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
Bovine ENDometrial cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
TGW-nu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
KM-H2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
HeLa.S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞
MuM-2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
RKO-AS45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞
L929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞
SK-Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞
Detroit-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
HO-8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞
BALB/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573細胞、HEL 92.1.7細胞、T9細胞
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
NH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
SNU-869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
Fox/NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
HCC202 Cells|人乳腺原發(fā)性導管癌細胞系
SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 201細胞、Panc 02細胞、TE32細胞
MC-3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-4細胞、HEC-251細胞、NCIH1417細胞
MDAMB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細胞、Hs606細胞、SEM細胞
D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2073細胞、SuDHL 4細胞、RGM-1細胞
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