"M059J Cells|人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞
SW-982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LADMAC細(xì)胞、C4I細(xì)胞、YD-38細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
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細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI6細(xì)胞、C22細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞
NH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-2細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞
GM00346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、BT474細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:6-1:8?jìng)鞔?;每周換液2-3次。
【凍存細(xì)胞操作】1)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計(jì)數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×10(7)/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10%二甲基亞砜(DMSO) 或甘油,可使冰點(diǎn)降低,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外;4)分裝于無(wú)菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時(shí)間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過(guò)快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細(xì)胞操作】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時(shí)搖動(dòng),使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達(dá)到10(7)/ml,在融后稀釋20倍時(shí),仍能保持5×10(5)/ml數(shù)量。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
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細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
NTC200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB15細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞、P815細(xì)胞
SUM149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒(méi)錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來(lái)復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō),人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
SR786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR-10細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞、639-V細(xì)胞
Hs-274-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞
H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、H-9細(xì)胞
293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞
VMCUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞
Hs934T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225-K6細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞
Nthy ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-3細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞、RDES細(xì)胞
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞
M059J Cells|人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
HLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 7細(xì)胞、ML-2細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞
SKCO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞
TE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞、GL-261細(xì)胞
EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-548細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
SK MES 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.3細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞
YAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE-3細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞、THP 1細(xì)胞
YAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE-3細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞、THP 1細(xì)胞
H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
Vero C1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206F細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞、TW01細(xì)胞
L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞
DrG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1373細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞
SK Col 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞
OLN 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co320細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞
hFOB1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Helacyton gartleri細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞、Ramos細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
H-295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-182細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞、UCH1細(xì)胞
TE-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞
Hs934T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225-K6細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞
SU-DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-522細(xì)胞、SW 579細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞
CCD-966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8653細(xì)胞、H-1836細(xì)胞、PJ34細(xì)胞
DLD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells細(xì)胞、alpha TC1-6細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞
AK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、HGMC細(xì)胞、TE-13細(xì)胞
TMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
LCLC-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞
Dakiki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞
SVGp12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2066細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞、TE354T細(xì)胞
VK-2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-445細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞、GLC82細(xì)胞
Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞
Clone 15 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞
AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞
BpRc1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME1細(xì)胞、H1048細(xì)胞、IM-9細(xì)胞
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
Pfeiffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-Wnt-3A細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞
L 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞
Psi-2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT 8810細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞
SW-403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細(xì)胞、HSC5細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞
BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞
H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞
7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞
NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞
FRO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441-4細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞、H716細(xì)胞
HIEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04679細(xì)胞、SW1573細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞
M059J Cells|人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61.5.3細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞
RIN-m細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-13細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞、H-1792細(xì)胞
H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
HCT-GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞
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