抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATP酶α1抗體
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英文名稱
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Anti-ATP1A1
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-ATP1A1
中文名稱 Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATP酶α1抗體
別 名 alpha 3 Sodium Potassium ATPase ; AT1A1_HUMAN; ATP1A1; Atpa-1; ATPase Na+/K+ transporting alpha 1 polypeptide; BC010319; EC 3.6.3.9; MGC3285; MGC38419; MGC51750; Na K ATPase alpha A catalytic polypeptide; Na K ATPase catalytic subunit alpha A protein; Na(+)/K(+) ATPase 1; Na(+)/K(+) ATPase alpha-1 subunit; Na+/K+ ATPase alpha 1 subunit; Na+/K+ ATPase 1; Nkaa1b; Sodium potassium ATPase alpha 1 polypeptide; Sodium pump 1; Sodium pump subunit alpha-1; Sodium/potassium transporting ATPase alpha 1 chain; Sodium/potassium-transporting ATPase subunit alpha-1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 細胞膜受體 G蛋白偶聯(lián)受體 新陳代謝 G蛋白信號
蛋白分子量 predicted molecular weight: 112kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATP1A1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATP酶α1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
聚二600標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Polyethylene Glycol 600
聚二1000標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Polyethylene Glycol 1000
聚二1500標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Polyethylene Glycol 1500
聚二3000標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Polyethylene Glycol 3000
聚二3350標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Polyethylene Glycol 3350
聚二4000標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Polyethylene Glycol 4000
聚二6000標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Polyethylene Glycol 6000
聚二8000標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Polyethylene Glycol 8000
聚二10000標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Polyethylene Glycol 10000
聚二12000標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Polyethylene Glycol 12000
毒莠定 進口、國產(chǎn) Picloram 含量:高純,99%
杜鵑花 進口、國產(chǎn) Azelaicacid 含量:PH=10
對基 進口、國產(chǎn) 4Aminophenol 含量:BR,97%
對基馬尿 進口、國產(chǎn) Sodium4aminohippurate 含量:BR,98%
對基 進口、國產(chǎn) 4Hydroxybiphenyl 含量:CP,95%
對偶 進口、國產(chǎn) 4Methoxyazobenzene 含量:AR,99%
對稱四 進口、國產(chǎn) Acetylenetetrabromide 含量:CP,99%
對二基聯(lián) 進口、國產(chǎn) Benzidine 含量:CP
對二基 進口、國產(chǎn) DMAP 含量:CP,99%
對二基偶間羧 進口、國產(chǎn) mMethylred 含量:BR,90%
胎球蛋白B/Fetuin β抗體Sitagliptin phosphate中文名:無水磷酸西他列汀別名:分子式:C16H18F6N5O5P
脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde中文名:別名:分子式:C8H6F2O3
纖維母細胞生長因子5抗體3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid中文名:別名:分子式:C12H12F2O4
鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體5-Chloro-2-nitrobenzoic acid中文名:別名:分子式:C7H4ClNO4
叉頭蛋白P1抗體2-Methyl-4-nitrobenzoic acid中文名:別名:分子式:C8H7NO4
Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATP酶α1抗體 Candida bombicola種屬:Candida bombicola
提供形式:凍干粉
安全等級:1
模式菌株:yes
應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:。產(chǎn)槐糖脂
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:YM培養(yǎng)基:酵母提取物 3.0 g,麥芽提取物 3.0 g, 葡萄糖 10.0 g, 蛋白棟 5.0 g, 瓊脂 20.0 g, 蒸餾水 1000 ml, pH 6.2 +/- 0.2。121℃,15min。
生長條件:24-28℃,好氧熊蜂生假絲酵母