抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
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英文名稱
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Anti-AMIGO1
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-AMIGO1
中文名稱 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
別 名 Adhesion molecule with Ig like domain 1; ali2; Alivin 2; AMIGO 1; AMIGO; AMIGO protein; Amphoterin induced gene and ORF (Amigo); Amphoterin induced gene and ORF; Amphoterin induced protein 1; KIAA1163; AMGO1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AMIGO1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
鹽嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Cyclizine Hydrochloride
維A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:30mg×5vials 英文名稱:
丹曲林相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
亞麻酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:5×50mg 英文名稱:Methyl Linolenate
依莰舒相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Ecamsule Related Compound B
葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Potassium Gluconate
氧標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Methoxsalen
鹽酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:
卡馬西平標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:
碳?xì)錁?biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Potassium Bicarbonate (AS)
醋酰 進(jìn)口、國產(chǎn) Acetamide 含量:試劑級
脆壁質(zhì)酶 進(jìn)口、國產(chǎn) Lysozyme(Chinkenegg) 含量:USP級,1:30000
大豆低聚糖 進(jìn)口、國產(chǎn) Stachyosehydrate 含量:AR,99%
大扶康 進(jìn)口、國產(chǎn) Fluconazole 含量:BR
大黃 進(jìn)口、國產(chǎn) Chrysophanicacid 含量:AR,99%
大黃素 進(jìn)口、國產(chǎn) Emodin 含量:CP
單水氫氧鋰 進(jìn)口、國產(chǎn) Lithiumhydroxidemonohydrate 含量:4N
單響尾蛇毒蛋白 進(jìn)口、國產(chǎn) Crotaline 含量:BR,98%
膽鈣骨 進(jìn)口、國產(chǎn) VD3 含量:IND
膽固物 進(jìn)口、國產(chǎn) Cholesterylchloride 含量:超純,99%
F-box蛋白相關(guān)蛋白11抗體Sertaconazole中文名:舍他康唑別名:分子式:C20H15Cl3N2OS
FBXL5蛋白抗體Doxapram hydrochloride monohydrate中文名:鹽酸多沙普侖別名:分子式:C24H33ClN2O3
FBXL12蛋白抗體Depofemin中文名:環(huán)戊丙酸雌二醇別名:分子式:C26H36O3
FBXL3蛋白抗體Quinestrol中文名:炔雌醇環(huán)戊醚別名:分子式:C25H32O2
F-box蛋白相關(guān)蛋白33抗體Tetracaine中文名:丁卡因別名:分子式:C15H24N2O2
粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 Candida parapsilosis種屬:Candida parapsilosis
提供形式:凍干管,斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:yes
應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:。測定酮康唑,降低羥基苯甲酸,降解苯酚產(chǎn)生(S)-1,3-丁二醇脫氫酶,產(chǎn)脂肪酶,質(zhì)量控制菌株
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:YM培養(yǎng)基:酵母提取物3.0 g ,麥芽提取物3.0 g ,葡萄糖10.0 g ,蛋白棟5.0 g,瓊脂20.0 g, 蒸餾水1000 ml ,pH 6.2 +/- 0.2。
傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件:25-28℃,好氧
存儲條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。近平滑假絲酵母