抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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肌萎縮側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體
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英文名稱(chēng)
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Anti-ALS2CR4
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱(chēng) Anti-ALS2CR4
中文名稱(chēng) 肌萎縮側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體
別 名 ALS2CR4 protein, N terminus truncated; Amyotrophic lateral sclerosis 2 (juvenile) chromosome region, candidate 4; TM237_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 45kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ALS2CR4
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是肌萎縮側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體 的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品:
1,6脫水喃葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱(chēng):1,6anhydroDglucose
四熒光素標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱(chēng):Erythrosine Sodium
鹽多標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:600mg 英文名稱(chēng):Dobutamine Hydrochloride
碳標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱(chēng):
瑞美松龍標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱(chēng):Rimexolone
亞基二芐標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱(chēng):Iminodibenzyl
長(zhǎng)春西汀相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:30mg 英文名稱(chēng):
大豆素標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱(chēng):Daidzein
刺芒柄花素標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱(chēng):Formononetin
克羅米通標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Crotamiton
ω基十一 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 11Aminoundecanoicacid 含量:AR,99%
橙 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Acridineorange 含量:AR,99%
黃素 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Acriflavine 含量:AR,99%
阿的平鹽鹽 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Quinacrinedihydrochloride 含量:CP
阿東糖 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Adonitol 含量:BR,98%
阿佛曼菌素 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Abamectin 含量:段:6000,4000,3000,2000,1500,1000,500,200
阿卡糖 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Acarbose 含量:AR,98%
阿拉伯樹(shù)脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Gumacaciapowder 含量:超純,99%
阿利新藍(lán)8GX 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) AlcianBlue8GX 含量:USP級(jí),98%
阿摩西林三水物 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Amoxicillintrihydrate 含量:BR
成纖維細(xì)胞激活蛋白α抗體2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate中文名:別名:分子式:C19H14F2O6
Fas相關(guān)磷酸酶1/蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型13抗體D-Mannitol diacetonide中文名:別名:分子式:C12H22O6
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子17抗體Pemetrexed中文名:培美曲塞二鈉別名:分子式:C20H21N5O6
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23抗體4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester中文名:別名:分子式:C16H16N4O3
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子20抗體Pemetrexed disodium中文名:培美曲塞二鈉別名:分子式:C21H23N5Na2O6
肌萎縮側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體 Staphylococcus│carnosus種屬:Staphylococcus│carnosus
分離基物:肥料
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):2
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:2
生長(zhǎng)條件:30℃
存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法肉葡萄球菌