抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.產(chǎn)品僅用于科研可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過(guò)程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測(cè)定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 別 名 ARRDC 4; Arrestin domain containing protein 4; ARRD4_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Sheep
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
英文名稱(chēng) Anti-ARRDC4
中文名稱(chēng) 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 45 kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ARRDC4
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無(wú)色試劑:內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無(wú)色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過(guò)夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來(lái)水充分沖洗。
13、產(chǎn)品僅用于科研如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
甜菊雙糖甙A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:300mg 英文名稱(chēng):Rebaudioside A
頭孢拉定標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Cephradine
碳標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱(chēng):Potassium Carbonate (AS)
奮乃靜標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Perphenazine
鹽異嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱(chēng):Promethazine Hydrochloride
雙嘧達(dá)莫標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Dipyridamole
鹽去咪嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱(chēng):Desipramine Hydrochloride
維生素K3標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Menadione (Vitamin K3)
草標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Chlordiazepoxide CIV
標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱(chēng):Potassium Benzoate (AS)
N,N二基脲 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Thiocarbanilide 含量:CP
N,N'二基脲 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 1,3Diphenylurea 含量:SP
N,N二環(huán)己基碳酰亞 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) DCCI 含量:AR,99%
N,N二基酰 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) DMFA 含量:BR,98%
N,N二基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) TETN 含量:AR,99.5%
N,N'二異基碳二酰亞 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) DIPCDI 含量:超純,99%
N,N二異基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) DIPEA 含量:CP
N,N'琥珀酰亞基碳酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) DSC 含量:高純,98.5%
N[3(二氧基基硅基)基]二 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 3(2Aminoethylamino)propyldimethoxymethylsilane 含量:BR,98%
N2嘧基4酰 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) SDNa 含量:BR,90%
F-box富含亮氨酸重復(fù)蛋白4抗體2'-Methylacetanilide中文名:乙酰鄰甲苯胺別名:分子式:C9H11NO
免疫球蛋白E受體Fc ε RIγ抗體2-Acetonaphthone中文名:2'-萘乙酮?jiǎng)e名:分子式:C12H10O
Fcγ免疫球蛋白IgG結(jié)合蛋白抗體1'-Acetonaphthone中文名:1'-萘乙酮?jiǎng)e名:分子式:C12H10O
磷酸肌醇結(jié)合蛋白1抗體N-Acetoacetylmorpholine中文名:N-乙酰丙酮嗎啉別名:分子式:C8H13NO3
磷酸化成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3抗體4'-Methoxyacetoacetanilide中文名:對(duì)乙酰乙酰氨基苯甲醚別名:分子式:C11H13NO3
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 Comamonas testosterone種屬:Comamonas testosterone
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件:30℃,好氧
生長(zhǎng)特性革蘭氏陰性細(xì)菌,化能異養(yǎng),嚴(yán)格好氧。
存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法睪丸酮叢毛單胞菌