抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體 別 名 ALRP; ANKR1_HUMAN; ANKRD 1; ANKRD1; Ankyrin repeat domain 1 (cardiac muscle); Ankyrin repeat domain containing protein 1; Ankyrin repeat domain-containing protein 1; C 193; C193; Cardiac ankyrin repeat protein; CARP; CVARP; Cytokine inducible nuclear protein; Cytokine-inducible gene C-193 protein; Cytokine-inducible nuclear protein; HA1A2; Liver ankyrin repeat domain 1; MCARP.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-ANKRD1/CARP
中文名稱 心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 36kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ANKRD1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測(cè)定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
環(huán)孢菌素標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Cyclosporine
酒石標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Levorphanol Tartrate CII
煙標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Niacin
唑標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:2g 英文名稱:Acetazolamide
酒石雙氫標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Dihydrocodeine Bitartrate CII
甘羅銨甘羅銨標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Glycopyrrolate
異卡波肼標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Isocarboxazid
二熒光素標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Diacetylfluorescein
醋地孕標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Megestrol Acetate
消旋蛋標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Racemethionine
L乳鈣 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) CalciumLactate 含量:BR,98%
L色酯鹽鹽 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) HTrpOMe•HCl 含量:特純,98.0%
L樹膠糖 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) L(+)Arabinose 含量:超純,98%
L絲酯鹽鹽 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) HSerOme•HCl 含量:特純,98%
L蘇酯鹽鹽 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) HThrOMe•HCl 含量:特純,98.0%
L天冬鈣 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) LAsparticacidcalciumsalt 含量:BR,99%
L天冬 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) PotassiumLAspartate 含量:BR,98%
L天冬素 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) LAsparagine 含量:BR,99%
L天冬素一水 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) LAsparagineMonohydrate 含量:BR,99%
L天門冬二酯鹽鹽 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) LAsparticaciddimethylesterhydrochloride 含量:BR,98%
F-box蛋白45抗體Trityl candesartan cilexetil中文名:別名:分子式:C52H48N6O6
法尼基二磷酸合酶抗體Trityl candesartan中文名:別名:分子式:C43H34N6O3
IgG-Fc片斷受體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白α抗體Candesartan中文名:坎地沙坦別名:分子式:C24H20N6O3
鐵氧化還原蛋白還原酶抗體Candesartan ethyl ester中文名:別名:分子式:C26H24N6O3
磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid中文名:別名:分子式:C8H10N2O3S
心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體 Salmonella enterica subsp.enterica種屬:Salmonella enterica subsp.enterica
分離基物:tissue,animal
提供形式:凍干粉
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:ControlCulturemediatestingpreparatorytestcontrol
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。
生長(zhǎng)條件:30℃,好氧,24h,鏡檢為陰性短桿菌,純腸炎沙門氏菌腸炎亞種