抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-ASL/Argininosuccinate Lyase
中文名稱 琥珀酸裂解酶抗體
別 名 Argininosuccinase; Argininosuccinate lyase; Arginosuccinase; ARLY_HUMAN; ASAL; ASL; EC 4.3.2.1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 新陳代謝
蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ASL/Argininosuccinate Lyase
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是琥珀酸裂解酶抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
膠原 IA N2Phenoxyacetyl Guanine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口96孔板質(zhì)粒DNAout(離心法)
膠原 IV (四型) 6OMethyld3guanine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口96孔板質(zhì)粒DNAout(真空法)(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
膠原 V (五型) N7(2Carbamoylhydroxyethyl)guanine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout
透明質(zhì) 2Amino,8dihydroxypurine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國進口大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout
黃嘌呤化 alltrans Retinoic Acid Methyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:美國進口大提柱式Ti質(zhì)粒DNAout(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
胰蛋白抑制劑 13cis Retinoic Acid Methyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:美國進口大提柱式質(zhì)粒DNAout
蝸牛 rac 4Hydroxy9cisretinoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口革氏陽性細菌質(zhì)粒DNAout
核糖核 A Caged Retinoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口中提柱式BAC DNAout
蛋白 K 5,6Epoxy3cis Retinoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口柱式BAC DNAout
蛋白 E rac alltrans 4Hydroxy Retinoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口柱式Ti質(zhì)粒DNAout(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
辣根過化物 9cis Retinoyl βDGlucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口柱式酵母質(zhì)粒DNAout
胃蛋白抑制劑 4Keto 9cis Retinoic Acid Methyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:美國進口柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout
果膠離析 alltrans 5,6Epoxy Retinoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口柱式質(zhì)粒DNAout(50次)
木瓜蛋白 9cisRetinoic acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口一步法質(zhì)粒DNA提?。í毤遥?/span>
還原型輔 II 4Keto 13cisRetinoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout(離心法)(停產(chǎn))
還原型輔 I 4Keto 9cis Retinoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout(離心法)(停產(chǎn))
化型輔 I alltrans 4Keto Retinoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout(真空法)(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
細胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體Ciwujianoside E中文名:別名:Guaianin A分子式:C40H62O11
CD38抗體Cimigenol-3-one中文名:升麻酮別名:分子式:C30H46O5
碳酸酐酶1抗體β-Hederin中文名:五加苷K別名:Eleutheroside K分子式:C41H66O11
碳酸酐酶2抗體Ketohakonanol中文名:別名:分子式:C29H48O2
絲/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶抗體Casein kinase Ⅱα(CKⅡα)Tetrahymanol中文名:四膜蟲醇別名:Gammaceran-3β-ol; Wallichiniol分子式:C30H52O
琥珀酸裂解酶抗體 Methylobacteriumaquaticum種屬:Methylobacteriumaquaticum
分離基物:飲用水,西班牙塞維利亞
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:181
生長條件:28℃Methylobacteriumaquaticum