抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-DDX19B/DBP5
中文名稱 解旋酶DEAD5抗體
別 名 DDX19B; Dbp5; DDX19; DEAD box protein 19B; DEAD box RNA helicase DEAD5; helicase DEAD5; DD19B_HUMAN; ATP-dependent RNA helicase DDX19B; DEAD box RNA helicase DEAD5; DBP5; TDBP.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DDX19B
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是解旋酶DEAD5抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
1Bromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)四分子交聯(lián)體5一抗
鹽吐根 2Bromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1一抗
鹽藥根 9,10Bis(diethylphosphonomethyl)anthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)轉(zhuǎn)醇酶(轉(zhuǎn)羥酶)一抗(C端)
白屈菜紅 9Bromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(HPLC)瞬時受體電位離子通道蛋白6一抗
血根 2Bromo9,10diphenylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)促狀釋放激素一抗
高三尖杉 9Bromo0phenylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶一抗
利血平 2Chloroanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)四環(huán)素一抗
白楊素 9,10Dichloroanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)T細(xì)胞受體γ一抗
石榴皮鞣素 1,5Dibromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)Toll樣受體3一抗
喜樹 1,8Diiodoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)化色羥化酶一抗
續(xù)隨二萜 9Phenylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白一抗
千金子二萜 NPhenyl9anthramine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)化TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白一抗
1Iodonaphthalene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白44一抗
5羥糠 Benz[a]anthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)轉(zhuǎn)錄因子3一抗(螺旋環(huán)螺旋蛋白HE47)
β胡蘿卜素 1HCyclopenta[l]phenanthrene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)化轉(zhuǎn)錄因子3一抗
百秋李 Cyclopenta[fg]tetracene,2dione 質(zhì)量規(guī)格:轉(zhuǎn)錄因子Tbx3一抗
去木香內(nèi) Dibenz[a,h]anthracene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)微管蛋白β3一抗
肌動蛋白結(jié)合蛋白CORO1A抗體4-(2-Hydroxy-1-methoxyethyl)-1,2-benzenediol中文名:別名:分子式:C9H12O4
周期素依賴性激酶6抗體Ptelatoside B中文名:別名:分子式:C20H28O10
周期素依賴性激酶8抗體Erigeside C中文名:別名:分子式:C15H20O10
周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體2-Acetylbenzoic acid中文名:別名:分子式:C9H8O3
嗜鉻粒素A抗體Dihydroresveratrol中文名:二氫白藜蘆醇別名:分子式:C14H14O3
解旋酶DEAD5抗體 Streptomycesmegasporus種屬:Streptomycesmegasporus
分離基物:土壤
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:158