抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體 別 名 DAP Kinase 1; DAPK1; DAK1; DAP K1; DAPK 1; DAPK; DAPK1; Death Associated Protein Kinase 1; Death Associated Protein Kinase 1; Death-associated protein kinase 1; DKFZp781I035; DAPK1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-DAPK1
中文名稱 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞凋亡 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 160kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DAPK1 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
馬蘭草英文名稱:Ma Lancao保存:20℃,避光規(guī)格:2g環(huán)指蛋白88一抗
薄芝菌絲體粉英文名稱:Bozhi mycelium powder保存:20℃,避光規(guī)格:2g鋅指蛋白抑制NFκB蛋白一抗
寬葉纈草英文名稱:Latifolia保存:20℃,避光規(guī)格:1g環(huán)指蛋白98一抗
紫色姜英文名稱:Purple ginger保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g端粒酶結(jié)合蛋白P23一抗
結(jié)石草英文名稱:Stone grass保存:20℃,避光規(guī)格:2g生精細胞凋亡相關(guān)基因6一抗
莪術(shù)(溫郁金)英文名稱:Zedoary (Wen Yujin)保存:20℃,避光規(guī)格:1g轉(zhuǎn)移生長因子β受體3一抗(TGFβRⅢ,TGFβRⅢ)
甘草(脹果甘草)英文名稱:Licorice (Glycyrrhiza inflata)保存:20℃,避光規(guī)格:1g端粒酶相關(guān)蛋白1一抗
見血飛英文名稱:See blood fly保存:20℃,避光規(guī)格:1g谷酰轉(zhuǎn)酶3一抗
羊奶奶葉英文名稱:Yang grandma leaves保存:20℃,避光規(guī)格:5.0g凝血酶(凝血因子II)重鏈一抗
大果木姜子英文名稱:Large fruit Jiang Zi保存:20℃,避光規(guī)格:3gToll樣受體1一抗
隔山消英文名稱:Geranium Strictipes保存:20℃,避光規(guī)格:1gDNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA一抗
石吊蘭英文名稱:Shi Diaolan保存:20℃,避光規(guī)格:2g三葉肽因子2一抗
蒺藜英文名稱:Tribulus terrestris保存:20℃,避光規(guī)格:3g端粒結(jié)合蛋白2一抗
薯莨英文名稱:Dioscorea cirrhosa保存:20℃,避光規(guī)格:0.2g精子形成相關(guān)凋亡蛋白7一抗
紫菀英文名稱:Aster保存:20℃,避光規(guī)格:1g辣椒素受體一抗
黃芩英文名稱:Baikal Skullcap保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1一抗
餓螞蝗英文名稱:Manyflower tickclove herb保存:20℃,避光規(guī)格:1g胸腺肽α1一抗
陽離子轉(zhuǎn)運調(diào)控樣蛋白1抗體Methyl 3,4,5-trimethoxybenzoate中文名:3,4,5-三甲氧基苯甲酸甲酯別名:分子式:C11H14O5
細胞死亡活化蛋白抗體3-Hydroxy-8,9-methylenedioxypterocarpene中文名:別名:分子式:C16H10O5
5號染色體開放閱讀框44抗體5-Hydroxy-1,7-diphenyl-6-hepten-3-one中文名:別名:分子式:C19H20O2
心臟特異性絲氨酸蛋白酶抗體6-Hydroxybenzofuran-2(3H)-one中文名:別名:分子式:C8H6O3
細胞色素P450Ⅱj3抗體4-Hydroxybenzamide中文名:別名:分子式:C7H7NO2
凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體 Aerococcusurinae種屬:Aerococcusurinae
分離基物:人類的尿路感染,丹麥
安全等級:1
模式菌株:yes
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:58
生長條件:30℃,厭氧脲氣球菌