抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-DCTN1/Dynactin 1
中文名稱 動力蛋白激活蛋白1抗體
別 名 Alternative names150 kDa dynein associated polypeptide; 150 kDa dynein-associated polypeptide; DAP 150; DAP-150; DAP150; DCTN 1; DCTN1; DCTN1_HUMAN; DP 150; DP-150; DP150; Dynactin 1 (p150 Glued (Drosophila) homolog); Dynactin 1 (p150 glued homolog Drosophila); Dynactin 1; Dynactin subunit 1; Dynactin1; HMN7B; P135; p150 Glued (Drosophila) homolog; p150 glued; p150 glued homolog; p150(GLUED) DROSOPHILA HOMOLOG OF; p150-glued; p150glued.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 142kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DCTN1/Dynactin 1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是動力蛋白激活蛋白1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
唑沙宗英文名稱:Chlorzoxazone保存:20℃,避光規(guī)格:50mg尿素轉(zhuǎn)運型糖蛋白A2一抗
西洛他唑英文名稱:Cilostazol保存:20℃,避光規(guī)格:50mg可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白3A1一抗
化可的松琥珀鈉英文名稱:Hydrocortisone sodium succinate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg絲裂原活化蛋白激酶酶p38γ一抗
卡巴膽英文名稱:Kaba choline保存:20℃,避光規(guī)格:30mg化絲裂原活化蛋白激酶酶p38γ一抗
鹽帕羅西汀英文名稱:Pa Rossi Dean hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化沉默調(diào)節(jié)蛋白1一抗
尼可占替諾(煙占替諾)英文名稱:Xantinol nicotinate (xanthinol nicotinate)保存:20℃,避光規(guī)格:100mg線粒體促凋亡蛋白一抗
奧沙普秦英文名稱:O Schaap Qen保存:20℃,避光規(guī)格:50mg分泌型卷曲相關(guān)蛋白1一抗
鹽藥根英文名稱:Ammonium glycyrrhizinate保存:20℃,避光規(guī)格:20mg精結(jié)合蛋白2一抗
鹽巴馬汀英文名稱:And Hou Pufen保存:20℃,避光規(guī)格:30mg溶質(zhì)載體蛋白家族35成員C2一抗
甘草銨英文名稱:Ammonium glycyrrhizinate保存:20℃,避光規(guī)格:20mg轉(zhuǎn)綠激活蛋白SRCAP一抗
和厚樸英文名稱:And Hou Pufen保存:20℃,避光規(guī)格:20mg神經(jīng)元電壓門控鈉通道蛋白β2/Na+ CP type IIβ一抗
厚樸英文名稱:Hou Pufen保存:20℃,避光規(guī)格:20mg紅細(xì)胞膜蛋白STOM一抗
薄荷腦英文名稱:Menthol保存:20℃,避光規(guī)格:100mg鈉依賴性脯轉(zhuǎn)運PROT一抗
辛弗林英文名稱:Synephrine保存:20℃,避光規(guī)格:20mg基轉(zhuǎn)運蛋白2一抗
延胡索素英文名稱:Tetrahydropalmatine保存:20℃,避光規(guī)格:20mg鈉離子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα一抗
香英文名稱:Eugenol保存:20℃,避光規(guī)格:0.5ml電壓門控鈉通道SCN3α蛋白/Na+ CP type IIIα一抗
去氧膽英文名稱:Deoxycholic acid保存:20℃,避光規(guī)格:100mg細(xì)胞周期蛋白SG2N一抗
NK細(xì)胞抑制性受體2DL1抗體Hirsutenone中文名:別名:分子式:C19H20O5
3號染色體開放閱讀框67抗體Moracin D中文名:別名:分子式:C19H16O4
κ-酪蛋白抗體Porson中文名:別名:分子式:C22H26O6
唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素7抗體Myricanol triacetate中文名:別名:分子式:C27H32O8
1號染色體開放閱讀框195抗體Rubranol中文名:別名:1,7-Bis(3,4-dihydroxyphenyl)-3-heptanol分子式:C19H24O5
動力蛋白激活蛋白1抗體 Xanthomonascampestris種屬:Xanthomonascampestris
分離基物:蒼耳
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
生長條件:25℃Xanthomonascampestris