抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-Defensin alpha 4
中文名稱 防御素α4抗體
別 名 Neutrophil defensin 4; Defensin, alpha 4; HNP-4; HP-4; defensin, alpha 4, corticostatin; neutrophil defensin 4 precursor; neutrophil defensin 4 preproprotein.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 細胞生物 免疫學 細胞膜受體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 3.8kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Defensin alpha 4
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是防御素α4抗體 的相關熱銷產(chǎn)品:
尼莫地平雜質(zhì)Ⅰ英文名稱:Mestanolone保存:20℃,避光規(guī)格:50mg化染色體濃縮調(diào)控蛋白1一抗
美雄諾龍英文名稱:Cresol保存:20℃,避光規(guī)格:50mg染色體濃縮調(diào)控蛋白1一抗
對英文名稱:Mcresol保存:20℃,避光規(guī)格:100mg受體結(jié)合絲蘇激酶2一抗
間英文名稱:Two trimethoprim保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化受體結(jié)合絲蘇激酶2一抗
二氧芐啶英文名稱:Magnesium valproate保存:20℃,避光規(guī)格:50mg絲/蘇激酶p90RSK蛋白一抗
鎂英文名稱:4 hydroxy benzene between two formic acid保存:20℃,避光規(guī)格:50mg受體激活蛋白激酶C1一抗
4羥間二英文名稱:4 hydroxy benzoic acid保存:20℃,避光規(guī)格:50mg孤兒核受體一抗
4羥英文名稱:Six fluorine isopropanol保存:20℃,避光規(guī)格:50mgRas特異性鳥嘌呤核苷釋放因子1
六氟異英文名稱:Seven halothane保存:20℃,避光規(guī)格:100mg核糖體S6激酶RSK2一抗
七氟英文名稱:N methyl Pa Rossi Dean保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3一抗
亞葉鈣英文名稱:Calcium folinate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg細胞周期檢控Rad17蛋白一抗(復制因子C)
月桂卓英文名稱:Laurocapram保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化細胞周期檢控Rad17蛋白一抗
異山梨英文名稱:Isosorbide dinitrate保存:20℃,避光規(guī)格:100mgmTOR相關調(diào)控蛋白一抗
消旋山莨菪英文名稱:Racemic Anisodamine保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化mTOR相關調(diào)控蛋白一抗
魚腥草素鈉英文名稱:Sodium Houttuyfonate保存:20℃,避光規(guī)格:50mg雷帕霉素靶蛋白復合體2一抗
羧司坦英文名稱:Carbocisteine保存:20℃,避光規(guī)格:100mg核轉(zhuǎn)錄因子NFKBRelB蛋白一抗
色甘鈉英文名稱:Cromolyn sodium保存:20℃,避光規(guī)格:1000mgS6核糖體蛋白一抗
心動加速蛋白多肽抗體Platyphyllonol中文名:別名:分子式:C19H22O4
毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗體Rhuscholide A中文名:別名:分子式:C31H42O3
鉀通道相互作用蛋白3抗體Centrolobol中文名:別名:分子式:C19H24O3
氯離子通道調(diào)節(jié)蛋白1A抗體Platyphyllenone中文名:別名:分子式:C19H20O3
磷酸化心肌肌鈣蛋白抗體2,3,5,4'-Tetrahydroxystilbene 2-O-glucoside中文名:別名:分子式:C20H22O9
防御素α4抗體 Sphingomonasaerophila種屬:Sphingomonasaerophila
分離基物:空氣(韓國濟州島)
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:179
生長條件:28℃Sphingomonasaerophila