"MDA231-LM2-4175 cell line人高轉(zhuǎn)移性乳腺癌細胞系
細胞背景資料：乳腺癌
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MDA231-LM2-4175 cell line人高轉(zhuǎn)移性乳腺癌細胞系
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
CRFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
SK-RC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
MC3T3-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
TF-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞
H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
HEC1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
BSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞
MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞
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L-Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
HCC-9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞
Z-138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
Z-138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
Hs-611-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
HMEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞
B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLTC-1細胞、HT 29細胞、OVCAR-3細胞
33604細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-18細胞、H-711細胞、U118細胞
253J B-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
RPMI-8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞
U373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
MBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
NCI-H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
S16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞
CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
SUM-52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞
COLO201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞
CAL-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
LS174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung-65細胞、Ra #1細胞、P3/X63/Ag8細胞
SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
HCC-1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞
NCI-H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細胞、Strain V細胞、B16細胞
NCI-H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
Hs 695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞
CHP 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞
rRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞
NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
PC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
HCC-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
NCIH1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞
RS4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
3T3 L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞
PAMC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
TR-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
NCI-H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞
Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
MDA231-LM2-4175 cell line人高轉(zhuǎn)移性乳腺癌細胞系
EC9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞
BHK 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞
A375S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞
NEC8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、PANC1005細胞、RL95-2細胞
CCC-HSF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細胞、SW 1463細胞、CCD1095Sk細胞
MC3T3-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細胞、Normal fibroblast-10細胞、PC-3細胞
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