"JVM-3細(xì)胞:人慢性髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:慢性髓白血??;女性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮
目前,跟公司簽訂長(zhǎng)期戰(zhàn)略合作伙伴的科研單位有山西中醫(yī)學(xué)院、福建醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院、上海市第六人民醫(yī)院、北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部、同濟(jì)大學(xué)、四平中心醫(yī)院、廣州中醫(yī)藥大學(xué)、中科院上海生命科學(xué)研究院生化與細(xì)胞研究所、解放軍第306醫(yī)院、江南大學(xué)、西南醫(yī)院、吉首大學(xué)、西南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院、寧波大學(xué)、福建醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、蘇州市同濟(jì)醫(yī)院、中南大學(xué)、延安大學(xué)附屬醫(yī)院、中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所、天津市兒童醫(yī)院、江蘇省中醫(yī)藥研究院、湘雅醫(yī)學(xué)院、第四軍醫(yī)大學(xué)預(yù)防系勞動(dòng)與環(huán)境教研室、揚(yáng)州大學(xué)、上海交通大學(xué)、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)、浙江省立同德醫(yī)院、中國(guó)人民解放軍第150中心醫(yī)院、蘇州大學(xué)、四川大學(xué)華西醫(yī)院、云南大學(xué)、揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院、海南醫(yī)學(xué)院、江蘇腫瘤醫(yī)院、上海市閔行區(qū)中心醫(yī)院、大連醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院、沈陽藥科大學(xué)、廣州市第八人民醫(yī)院、南京大學(xué)、浙江中醫(yī)藥大學(xué)、蘭州大學(xué)、上海中醫(yī)藥大學(xué)、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所、廈門市婦幼保健院、大學(xué)、南京軍區(qū)總醫(yī)院、天津市人民醫(yī)院、北京醫(yī)學(xué)科學(xué)腫瘤醫(yī)院、上海市同濟(jì)醫(yī)院、江蘇大學(xué)、桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所
凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細(xì)胞器脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細(xì)胞逐步脫水,細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序:采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí),1~2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),5~10℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí),可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內(nèi)降至液氮表面過夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法:1.預(yù)先配制凍存液》(1)8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液(92%血清)2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量?jī)龃嬉?,用吸管吹打制成?xì)胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml)。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中,密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法:1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動(dòng)冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3分鐘)。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題:可以這樣說,對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長(zhǎng)越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問題就是,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外,還有一個(gè)更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài),不成片不連體。
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞
HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞
Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:0V-1063細(xì)胞、DU_145細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞
H 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
OCI-Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m 14B細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞
HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞
OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞
L-cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞
IB-RS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1417細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞
A-172 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞
NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB 106細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞
ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
VSC4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH-1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞、118 MG細(xì)胞
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞
MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞
SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細(xì)胞、PF382細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid細(xì)胞: No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
Hs-343-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL83B細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞
RAG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFTF細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞、CD18細(xì)胞
H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K1細(xì)胞、P388細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2106細(xì)胞、130 T細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞
H-1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S180細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞
BxPC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7666細(xì)胞、M 1細(xì)胞、H-345細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
OCI-LY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-18Co細(xì)胞、A-427細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞
SUM 159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8-D1A細(xì)胞、IALM細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞
GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞
PANC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHAGOK1細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞
C4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80UBC細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞
Mo7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞
MDCK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細(xì)胞、HS578T細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞
Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞
SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞
MDA 435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、T47D細(xì)胞
BJAB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF767細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞
HEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞
697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC3細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞
SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞
H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
MDAMB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細(xì)胞、BC-023細(xì)胞、IM9細(xì)胞
HEH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、SNU119細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
KATOIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-841細(xì)胞、Z310細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞
SW 626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1/sq細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、159 PT細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞
P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
Farage Original Line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞
Mv1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞、GM05862細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞
EBTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME1細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞
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