"WILL-2細胞:人彌漫大B淋巴瘤細胞系
細胞背景資料:彌漫大B淋巴瘤;女性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:懸浮
細胞傳代注意事項:①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材;②每天觀察細胞形態(tài),掌握好細胞是否健康的標準:健康細胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長致密時即可傳代;③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象,應立即采取措施,一般應棄置污染的細胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持:細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點,要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
KAT-5細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞
A375-SM細胞系相關產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產(chǎn)品:N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
P3J細胞系相關產(chǎn)品:SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞
HT 1197.T細胞系相關產(chǎn)品:RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞
NCI-H1651細胞系相關產(chǎn)品:Caco-2/ATCC細胞、NCI/ADRRES細胞、ARO 81-1細胞
KP-N-YN細胞系相關產(chǎn)品:SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞
BRL-3A細胞系相關產(chǎn)品:Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞
HUT 28細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
L(TK-)細胞系相關產(chǎn)品:MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
HAEC細胞系相關產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
MOVAS細胞系相關產(chǎn)品:SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
RetroPack PT67細胞系相關產(chǎn)品:MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞
Hepa-RG細胞系相關產(chǎn)品:SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
NRK細胞系相關產(chǎn)品:DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
SK_HEP1細胞系相關產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
SK_HEP1細胞系相關產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
PLB 985細胞系相關產(chǎn)品:SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
Rat Lung-65細胞系相關產(chǎn)品:M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
MDCKII-WT細胞系相關產(chǎn)品:MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞
MRC-5細胞系相關產(chǎn)品:Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
COLO_320DM細胞系相關產(chǎn)品:HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞
SW48細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
X63細胞系相關產(chǎn)品:MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
NCIH1770細胞系相關產(chǎn)品:J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
HHL-5細胞系相關產(chǎn)品:PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞
SKHEP1細胞系相關產(chǎn)品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
MDAMB361細胞系相關產(chǎn)品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞
NCI-H378細胞系相關產(chǎn)品:WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞
H-2107細胞系相關產(chǎn)品:rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞
NCIH1734細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞
WML2細胞系相關產(chǎn)品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
Walker 256細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞
U-266 AR1細胞系相關產(chǎn)品:DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
XuanWei Lung Cancer-05細胞系相關產(chǎn)品:GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞
U-87 MG細胞系相關產(chǎn)品:LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關產(chǎn)品:WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關產(chǎn)品:WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
A 375細胞系相關產(chǎn)品:Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
SMMC-7721細胞系相關產(chǎn)品:CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
SNU-484細胞系相關產(chǎn)品:T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
U-373 MG細胞系相關產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
H-1092細胞系相關產(chǎn)品:Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
GBCSD細胞系相關產(chǎn)品:Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
J-111細胞系相關產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關產(chǎn)品:COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
SCC VII細胞系相關產(chǎn)品:AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
T98 G細胞系相關產(chǎn)品:Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
MDA-MB-231-luc細胞系相關產(chǎn)品:211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞
TE1細胞系相關產(chǎn)品:H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
OVCAR8細胞系相關產(chǎn)品:RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
Panc05.04細胞系相關產(chǎn)品:HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
CAL851細胞系相關產(chǎn)品:CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞
C127細胞系相關產(chǎn)品:M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
NCI-H2195細胞系相關產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
KMH-2細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly1細胞、SJRH-30細胞、aTC1 Clone 6細胞
KMH-2細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly1細胞、SJRH-30細胞、aTC1 Clone 6細胞
3-LL細胞系相關產(chǎn)品:CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
PCI-04B細胞系相關產(chǎn)品:CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
NCIH847細胞系相關產(chǎn)品:SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
NCI-H1650細胞系相關產(chǎn)品:P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞
DMS53細胞系相關產(chǎn)品:Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞
SU-DHL1細胞系相關產(chǎn)品:Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
HEM細胞系相關產(chǎn)品:SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞
RS411細胞系相關產(chǎn)品:NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
H1770細胞系相關產(chǎn)品:H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞
Adeno-293細胞系相關產(chǎn)品:VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
NCI-322細胞系相關產(chǎn)品:H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞
H226細胞系相關產(chǎn)品:H-1882細胞、SK N SH細胞、CEM.C1細胞
Mv1.Lu細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞
OP9細胞系相關產(chǎn)品:SNU354細胞、H865細胞、H-441細胞
TOV21G細胞系相關產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、NTHY-ORI3.1細胞、253J細胞
HUTU80細胞系相關產(chǎn)品:SK-LMS-1細胞、NCIH2135細胞、C-Lu65細胞
Vx2細胞系相關產(chǎn)品:Tu212細胞、HCC-1187細胞、C-8161細胞
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