"C8166細胞:人T淋巴細胞白血病細胞系
細胞背景資料:T淋巴細胞白血??;HTLV-1轉(zhuǎn)化
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性:懸浮
培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】1)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
我們都知道世界宇宙浩瀚無極,除了我們知道的地球、太陽、月球、銀河系以外還有好多其他宇宙行星,這樣的世界對于很多人來說很陌生稀奇甚至無法想象,這樣的世界同樣也是我們無法觸摸的,然而還有一個微觀的世界也是我們無法接觸的,這個就是——細胞里的微觀世界。對于很多人來說,除了從書本上簡單了解植物細胞的知識以外,在行業(yè)外人的意識里,細胞還是一個讓人一頭霧水的詞語,甚至都是一個無形的存在,更別提描述和看見這個東西,但是對于行業(yè)內(nèi)的生物科學(xué)研究者和醫(yī)學(xué)研究者,這是個經(jīng)常被運用到的必需之物,用宇宙世界的包含于被包含的關(guān)系把細胞的微觀世界剖析開來,讓我們了解到細胞是什么樣的東西及應(yīng)用和未來世界細胞在生命中的重要作用。細胞發(fā)炎——心臟疾?。籇NA受損——癌癥;細胞能量衰退——腎功能衰竭、關(guān)節(jié)炎、帕金森氏;老化蛋白堆積——糖尿病、癡呆癥、心腦血管疾病;所有的衰老和疾病都是機體內(nèi)細胞開的損傷、衰老和死亡造成的。所以細胞在科學(xué)研究和醫(yī)學(xué)研究中有著重要的應(yīng)用作用,尤其是原代細胞,它是從機體組織中分離提取培養(yǎng),它可以作為一種科研材料幫助研究者進行項目研究和課題研究,也可以幫助醫(yī)學(xué)者進行疾病研究和疾病試驗,試想從人體組織中分離培養(yǎng)的細胞經(jīng)過醫(yī)學(xué)藥物的試驗再運用到人體身上,無論從功效還是結(jié)果上效果都是。
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
KNS-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1876細胞、RS1細胞、BRL 3A細胞
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
G519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞
Daoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞
H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
Namalwa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
CCK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞
BT-474細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
NCI-H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞
P36細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
KNS-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞
WERI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
ESC-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
ESC-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
Hs 675.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PanC1細胞、KYSE-270細胞、NHEK細胞
HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
B16-F10--RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
KLM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
NCI-H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細胞、COLO206F細胞、K422細胞
LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
MDA436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞
BMSC/hBMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞
NPA-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞
Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞
GM03570E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-2細胞、WM-239A細胞、Lu-165細胞
Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
CCD-112CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞
B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
CF PAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞
ST2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
H-810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞
SNU878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
H1666_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
Hi5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
CCD 841 CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞
NCIH146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
ETCC007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
Panc-10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞
RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
HS-294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HF-91細胞、Hep 2細胞、LIXC002細胞
Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
Pt-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞
Be Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞
Be Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞
Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞
NOR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
C28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
FO [Mouse myeloma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/Fujioka細胞、Colo16細胞、MHH-CALL-2細胞
NCI-H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞
OVHM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞
Bovine ENDometrial cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
FAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞
PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
Lu99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞
JCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
Emory University-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細胞、RCC-10RGB細胞、SK-N-BE-2c細胞
Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CRFK細胞、RCC23細胞、VP 229細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL16細胞、KU 812細胞、NCIH889細胞
HSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細胞、PG-4(S+L-)細胞、DLM8細胞
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