"Nb2-11細(xì)胞：大鼠淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：惡性淋巴瘤；雄性；Nb
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮
購(gòu)買細(xì)胞注意事項(xiàng)：１)收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系；２)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等；３)用７５%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次；４)建議客戶收到細(xì)胞后前３天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流?！炯?xì)胞傳代操作步驟】一、貼壁細(xì)胞傳代：１)提前將培養(yǎng)基、PBS放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用７５%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)；２)吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞；３)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，３７℃孵育，每隔２~３min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用；４)用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡；５)將細(xì)胞懸液分別接種到另外的２~３個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。二、懸浮細(xì)胞傳代：１)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，１０００rpm離心５min；２)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液；３)將細(xì)胞懸液分別接種到另外的２~３個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)。
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng)，生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好，譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞，生長(zhǎng)速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞，這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng)，而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候，細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了，老化的會(huì)比較多，對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞，如果細(xì)胞形態(tài)不好，（或者細(xì)胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無(wú)血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進(jìn)行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細(xì)胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來(lái)的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn)，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺(tái)，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的，尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以，消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài)，這個(gè)啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè)，因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來(lái)，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到７０%左右的時(shí)候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時(shí)候如果是用無(wú)血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來(lái)洗，洗的效果和用無(wú)血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來(lái)。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間，等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來(lái)的時(shí)候，就可以直接吹打下來(lái)，但是和胰酶消化一樣，要控制好時(shí)間，不能時(shí)間太過了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候，或者臨時(shí)沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。
U138-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN-6細(xì)胞、ST-2細(xì)胞、BIU87細(xì)胞
PNT1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞
UPCI-SCC-154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28/I2細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞、WM-115細(xì)胞
NS20-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442-A細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞、FM-88細(xì)胞
HPDE6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞
A427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoN細(xì)胞、SW 954細(xì)胞、RH-35細(xì)胞
HuPT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞
ES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML5細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞
SVEC 4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-711細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞
GM04678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞、GCT細(xì)胞
LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
HEK293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-7951細(xì)胞、H920細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞
G-401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH889細(xì)胞、OC316細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞
G-401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH889細(xì)胞、OC316細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞
A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞
H-1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞
CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞
CAL-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞
TALL-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mino細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞
HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞
BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞
H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-562細(xì)胞、P560細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
SW 948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial細(xì)胞： 1細(xì)胞
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
NK92-MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞
P3/X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞
H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM9細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞
BC3H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細(xì)胞、OC 316細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞
TM-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAC-P4C細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞
PA-TU S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322T細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞
HTh-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-MeWo細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞、YD-15細(xì)胞
NCI-SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIC細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞
P-388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-3細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞、HLF細(xì)胞
RM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞
WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞
C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細(xì)胞、GT39細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞
HCC1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute-38細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞
H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞
Tu 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞
NCIH69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細(xì)胞、H-1963細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞
Hepa1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dx5細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞、SAS細(xì)胞
NCI-H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞
DC 2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞
CAL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、HSC細(xì)胞
SK-Mel1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-2B4細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞
SU-DH-L5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞、EBTr細(xì)胞
LN-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLK細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞
UPCI:SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、HSC3細(xì)胞
MDA-MB-134 VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G292細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞
HCC-366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2591細(xì)胞、A 549細(xì)胞、LC-1細(xì)胞
ECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞
PL-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-29細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞
Hs1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hCMEC/D3細(xì)胞、UT7細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC-Y細(xì)胞、Tj-905細(xì)胞、CT-26細(xì)胞
HPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-3細(xì)胞、H2198細(xì)胞、YES2細(xì)胞
UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞
Hs 606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L132細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、E304細(xì)胞
NCI-H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL-68細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞：-1細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞
UPCI-SCC-154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28/I2細(xì)胞、H-727細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞、TE14細(xì)胞
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