"OCI-AML-2細胞:人急性髓系白血病細胞系
細胞背景資料:急性髓系白血病;男性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性:懸浮
常見培養(yǎng)細胞預(yù)防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質(zhì)不同,對各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好,預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性,且對細胞本身也有一定影響,因此為避免誘導(dǎo)抗藥細菌,應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應(yīng)選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動的紫外燈至少消毒30min,加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好。
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
P3-Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
NIH 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
CHL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373 MG細胞、Chang Cells細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
MBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
Fetal Human Colon細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞
HeLa S 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
PANC 1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞
MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
FHL124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
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HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞
JHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞
Gerner 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
RH35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞
KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
HS940細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
Hs 294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
Hs 274細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
TGW細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
Hs606細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
SCC 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
RAG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
NS1-Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞
OVCAR.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞
NP69SV40T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-2664細胞、HcaF細胞、GM01232細胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞
MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
NCI-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
CL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
MES-SA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
CD-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞
KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
LS 1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
SNK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞
SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
SKNBE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
HPDE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
OV1/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細胞、Okayama University Medical School-27細胞、D-283細胞
BRL-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-6細胞、CL40細胞、SUM190PT細胞
CHL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373 MG細胞、MFM223細胞、MCF10A細胞
GOTO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細胞、KBM7細胞、Becker細胞
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