"JVM-2細(xì)胞：EB病毒感染的人外周淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞是 J.V.Melo從一位６３歲患有套細(xì)胞淋巴瘤白人女性外周血中分離建立的，經(jīng)EBV介導(dǎo)獲得永生化，該細(xì)胞表達(dá)p１６和細(xì)胞周期蛋白D２,低水平表達(dá)細(xì)胞周期蛋白D１。
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞，可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代，部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟：①入無(wú)菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開(kāi)超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開(kāi)風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧；⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進(jìn)入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，步驟７-９不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過(guò)線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過(guò)夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液（92%血清）2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉?，用吸管吹打制成?xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱(chēng)和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過(guò)3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過(guò)離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)相關(guān)問(wèn)題總結(jié)：支原體(mycoplasma)污染的細(xì)胞，是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經(jīng)驗(yàn)之專(zhuān)家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株，無(wú)法以其外觀分辨之；支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長(zhǎng)參數(shù)，代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前，必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free，實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義；偵測(cè)出細(xì)胞株有支原體污染時(shí)，該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細(xì)胞株；CO２培養(yǎng)箱之水盤(pán)如何保持清潔？定期(至少每?jī)芍芤淮? 以無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子水更換之；為何培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，顏色會(huì)偏暗紅色，且pH值會(huì)越來(lái)越偏堿性？培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO２會(huì)逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí)，可以通入無(wú)菌過(guò)濾之CO２，以調(diào)整pH值；購(gòu)買(mǎi)之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；購(gòu)買(mǎi)之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
OVTOKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-65細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞
UCLA-SO-M20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2935細(xì)胞、Henrietta Lacks cells細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞
HCC-1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno 293細(xì)胞、MCFs細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞
HF-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞
Cattle chondrocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178YR細(xì)胞、S37細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞
COLO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766T細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞
MS-751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞
BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO K1細(xì)胞、SF17細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞
HO8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞
Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSC-19細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞
Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EnCa1細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞
McARH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADR.RES細(xì)胞、MRCV細(xì)胞、MASMC細(xì)胞
SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞
SK-BR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS11細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞
RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞
PANC-04-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-83細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
VP 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG7701細(xì)胞、HOP62細(xì)胞、THPI細(xì)胞
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞
CC-LP-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA Dx5細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞、OVHM細(xì)胞
J 774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞
UMUC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 1細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞
THPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞、HS940細(xì)胞
NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞
SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞
SKUT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5 B1-4細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、HepG2細(xì)胞
L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12PM6細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞
SF763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510A細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞、PBMC細(xì)胞
LAD2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-1細(xì)胞、RGB細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞
T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞
C32r細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞
HEL9217細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kato-III細(xì)胞、H1836細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞
4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞
KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7405細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、TE-7細(xì)胞
SW 527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細(xì)胞、H1435細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞
WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
SUM159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS153細(xì)胞、KMH2細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞
KATO III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 23.5細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞
BRL3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞
NCI-H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGIIIA細(xì)胞、HuH28細(xì)胞、TK.10細(xì)胞
NCI-H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞
BCaP-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-FET細(xì)胞、High Five細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞
RBL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞
H-1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞
PA-TU S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322T細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞
TF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang liver細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞
MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞
NCI-H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL-140細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞、HuT78細(xì)胞
T47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞
HN 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞
526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-52細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞、H548細(xì)胞
DI-TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12CPM6細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞
IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞
WIL2 Secreting細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞
Hs-729-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞
SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞
P3JHR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-MES13細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞
PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞
MDCC MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA-144細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞
WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
U-266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA.hy 926細(xì)胞、FM88細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞
Panc 2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細(xì)胞、U-343細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
HCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCaBER細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、ML-2細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
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