"Daudi細胞：人Burkkit淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：１９６７年，該細胞系KleinE和KleinG建系，源于一名１６歲患有Burkitt＇s淋巴瘤的黑人男性，beta-２-微球蛋白陰性，表達EBNA,VCA，sIg。該細胞攜帶EB病毒，是一個典型的B淋巴母細胞系，可用于白血病發(fā)病機制的研究。
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：懸浮生長
細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
HCS2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
NCI-H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞
Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞
WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
LMH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAOS 2細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞、NCI-H920細胞
CL 1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞
Turbot Embryonic細胞：細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞
GM03320D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
526 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細胞、293-EBNA細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞
BE(2)C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞
MHCC 97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
Intestinal Porcine Epithelial細胞：-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
CAKI.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞
MDA-MB-468-RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
Namalva細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
Namalva細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
LTEP-sm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
SUDHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
HGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞
H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞
NALM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞
HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
P3 88 D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞
L78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
DU-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRGEC細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、Hx-147細胞
HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
G 401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
PLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
NCI-H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞
MDA MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS-9L細胞、T-ALL1細胞、KMST-6細胞
HECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞
SUNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
HCE-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞
ARO-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞
TE 85 ClF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞
OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
GS-9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
NCIH1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞
JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
MDAMB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
HBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
QBI-HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞
SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞
TE-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
MDAMB134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞
GM00215A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
ETCC-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞
WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
C3H10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
BC-009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
SK.MEL.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞
CCK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞
Jurkat 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Kupffer細胞
PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
PL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞
WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
MDST8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞
KLN-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞
GT39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞
PAa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
EO771細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH841細胞、HGC27細胞、Jurkat E6.1細胞
H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNGM細胞、HCS-2/8細胞、NCIN87細胞
Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1588細胞、32D-Cl3細胞、RCC 7860細胞
H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2279細胞、HSAEC1-KT細胞、NCIH446細胞
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