"UMNSAH/DF-1細(xì)胞：雞胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
常見培養(yǎng)細(xì)胞預(yù)防污染的有效措施：體外培養(yǎng)的細(xì)胞受到嚴(yán)重污染時(shí)，有時(shí)即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：１)添加抗生素：各種抗生素性質(zhì)不同，對(duì)各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好，預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無對(duì)抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會(huì)使微生物產(chǎn)生耐藥性，且對(duì)細(xì)胞本身也有一定影響，因此為避免誘導(dǎo)抗藥細(xì)菌，應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理；２)從物品、用品消毒滅菌著手：細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細(xì)，并在取樣檢菌一周后確認(rèn)無菌才能使用。同時(shí)，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應(yīng)選擇最后過濾的液體進(jìn)行檢測(cè)。定期對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。具體操作：７５%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動(dòng)的紫外燈至少消毒３０min，加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制３００ml的飽和酸銅加３L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液（92%血清）2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉?，用吸管吹打制成?xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)相關(guān)問題總結(jié)：支原體(mycoplasma)污染的細(xì)胞，是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經(jīng)驗(yàn)之專家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株，無法以其外觀分辨之；支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長(zhǎng)參數(shù)，代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前，必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free，實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義；偵測(cè)出細(xì)胞株有支原體污染時(shí)，該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細(xì)胞株；CO２培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？定期(至少每?jī)芍芤淮? 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之；為何培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，顏色會(huì)偏暗紅色，且pH值會(huì)越來越偏堿性？培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO２會(huì)逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí)，可以通入無菌過濾之CO２，以調(diào)整pH值；購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
PC 61-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞
SF 295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 453細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞
SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Plaepi 34細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞、BHT101細(xì)胞
Hs746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞、U-87細(xì)胞
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞
KP4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS653細(xì)胞、F9細(xì)胞、VP229細(xì)胞
AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞
MUS-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞
OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞
Med 341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：373MG細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞
SUM-159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1341細(xì)胞、HS5細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞
LWnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞
HPF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
LA-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-62細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞
LA-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-62細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞
P3/NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3LL細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞
P3-Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-NFS-60細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞
NCM-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細(xì)胞、H-220細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
Swiss/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞
Madison lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-279細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞、K 562細(xì)胞
MGH-U3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-K8細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞
T/GHA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞
697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞
NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞
NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THC-8307細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞
SKMEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞
D-283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 Ad5細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
T241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞、MRC5細(xì)胞
TB-1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細(xì)胞、b.End3細(xì)胞、D341MD細(xì)胞
HuT 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞
TOV112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP-1細(xì)胞、DU145細(xì)胞、Hs683細(xì)胞
HCC2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞
CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞
Hs737T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN 205細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞、HA細(xì)胞
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
NCIH2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R細(xì)胞、CD-18細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞
HUV-EC-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞
MM-1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞
Hs1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hCMEC/D3細(xì)胞、UT7細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞
THP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞
HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞
108CC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW 42細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞、RT 112細(xì)胞
SW-626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3 M細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞
HAPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO細(xì)胞、H1944細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞
hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞
MV 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞
EBTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE2細(xì)胞、SNU869細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞
NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞
AE1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 357細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞、MM1S細(xì)胞
PMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細(xì)胞、FM-88細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞
BA/F3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞
MDA-MB-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞
PANC0327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
RIN m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2141細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞、SF 295細(xì)胞
NK-92.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D-Cl3細(xì)胞、H1573細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞
WM 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-OV-1細(xì)胞、N-2a細(xì)胞、BT325細(xì)胞
HTh 74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-415細(xì)胞、GM00637細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
NPA-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC92A細(xì)胞、H-4細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞
KGN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-RB50細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞
THLE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、MV411細(xì)胞
SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Plaepi 34細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞、C3A細(xì)胞
Panc_03_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1S細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞
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