"RKO-AS45-1細(xì)胞：人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵危宜腊?。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用，近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進(jìn)展，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個(gè)院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜，需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多，下面就一些動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對細(xì)胞毒性越小，越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高，會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在１００級空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時(shí)就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對于不需要長期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴：從液氮或超低溫冰箱中取出細(xì)胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
T-HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞、MDA134細(xì)胞
AtT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN13細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞
NCI-H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞
NCIH64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-201細(xì)胞、HL-1細(xì)胞、HOP62細(xì)胞
NUGC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-735細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞
NL-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LC-MS細(xì)胞、9L細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞
MCF/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M-17細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
RPMI 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid細(xì)胞： No. 18細(xì)胞
CC-LP-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA Dx5細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞、OVHM細(xì)胞
H-2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞
CV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVISE細(xì)胞、HSC細(xì)胞、H-2110細(xì)胞
LM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞
MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞
VP229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1222細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞
RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞
RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
EM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WISH細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞、Mino細(xì)胞
SK-N-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274.T細(xì)胞、IM-95細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞
JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞
H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mia PACA 2細(xì)胞、MM134細(xì)胞、H660細(xì)胞
VB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H526細(xì)胞、H-2452細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞
NHEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 435細(xì)胞、526 mel細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞
BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H209細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞、COLO679細(xì)胞
SV-HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro 2a細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞
MDA231-LM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細(xì)胞、MA-782細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞
H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細(xì)胞、UMR106細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞
HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞
SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞
WEHI3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-732細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞、Madison細(xì)胞
MONO-MAC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2135細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞
SKLU01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞
H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞
OV 1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞、RL細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
JURKAT E-6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞
GL-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞
HEC151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細(xì)胞、LN-382細(xì)胞、253J細(xì)胞
HBL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞
769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
MDA-MB-468-RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞
NCIH2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1.0細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞、LA 4細(xì)胞
High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞
TE13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1944細(xì)胞、GM05372細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞
8305-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞
Kit225 K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780細(xì)胞、PA12細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞
Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY-1細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞
SW-1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK4細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞、U14細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
253J B-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞、H838細(xì)胞
AR41P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
A549 ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC1細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞
22Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.231細(xì)胞、GM04680細(xì)胞、UT-7細(xì)胞
NL20SV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞
RGC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F0細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、A 72細(xì)胞
NS1-Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞、BHK細(xì)胞
RCC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞
SNT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞
NCI-H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL-68細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞、KHYG細(xì)胞
NCI-H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH 77細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞
NU-GC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC803細(xì)胞、ACCM細(xì)胞、MC 116細(xì)胞
SW-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞
LWnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2195細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞
Caco2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5B1-4細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞、H841細(xì)胞
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細(xì)胞、EC-109細(xì)胞、LS174細(xì)胞
NCI-H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細(xì)胞、B16細(xì)胞、H2073細(xì)胞
Leydig細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-26細(xì)胞、A498細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞
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