"KYSE-30細(xì)胞：人食道癌細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：來(lái)源于一位６４歲，患有高分化的中段食管鱗癌的男性患者。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過(guò)程錯(cuò)誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤；細(xì)胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái)，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離；rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來(lái)表示單位。

細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細(xì)胞死亡。因此，細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞，可以使冰點(diǎn)下降，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì)，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。

冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

BetaTC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞、A-172細(xì)胞

SW1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞

TE354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S.B.細(xì)胞、HCC44細(xì)胞、RS1細(xì)胞

IM9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang Cells細(xì)胞、W256細(xì)胞、FTC133細(xì)胞

HTh 74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-415細(xì)胞、GM00637細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞

MSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2227細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞

HOS/MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞

HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞

MFE-296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG1細(xì)胞、H-747細(xì)胞、A375mel細(xì)胞

SR-786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-4細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞

ECC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞、H2126細(xì)胞

BT-325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU601細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞

PLA801-95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-292細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞、H841細(xì)胞

NCI-SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott and White No. 13細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞、Y1細(xì)胞

MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞

MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、FLS細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞

MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、FLS細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞

RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細(xì)胞、BEND細(xì)胞、TE3A細(xì)胞

786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞

253J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3569細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、RT4P細(xì)胞

HEK-293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、Caki2細(xì)胞、GES-1細(xì)胞

MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞

SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞

Hs695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞

SK-ES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞

Hos TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細(xì)胞、H650細(xì)胞、ACC3細(xì)胞

WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞

REC 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-4006細(xì)胞、U266B1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞

DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞

HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞

Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞

KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞

NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞

MCF7/WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞

E.G7-OVA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞

K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞

MV-1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞

RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞

SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞

KG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞

BC-3-H-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞

McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞

TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞

251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578T細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞、HN 4細(xì)胞

WISH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN 93細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞

KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞

aNK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA8細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞

NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞

PT-67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞

SNT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞

Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞

MUG-Chor1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細(xì)胞、L細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞

SW756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M14細(xì)胞、7860細(xì)胞、CAL120細(xì)胞

D562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-PaCa-2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞

KNS42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4II細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞

HNE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞

SUDHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞

NCIH250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH322細(xì)胞、8305-C細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞

CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞

FHL-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL3細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞

NCTC 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02.03細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞

CV-1.K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVMANA細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞、RH8994細(xì)胞

GM07404A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞

Calu 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN6細(xì)胞、H220細(xì)胞、K299細(xì)胞

NCIH847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞

MDA-MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 116細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞

PLA801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388-D1細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞

HCC-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細(xì)胞、N-9細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞

ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SG231細(xì)胞、B-16細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞

P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-3細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞

McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞

NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞

TE354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S.B.細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞、HKC細(xì)胞

P3-X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞、P116細(xì)胞

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