"BEL-7405細(xì)胞：人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
ID8/MOSEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP1細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
EC9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA hy 926細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞
H-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143BTK-細(xì)胞、LN 229細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
MDA-MB-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞
MDA 231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、Ca761細(xì)胞、H719細(xì)胞
RA 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 1469細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞、A-704細(xì)胞
HCT116/L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 1005細(xì)胞、LAC細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞
Walker-Ca.256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
P30/Ohkubo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 433細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞
BJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞
P31/FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2A細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞
HEK-293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F10細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、High 5細(xì)胞
HEK-293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F10細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、High 5細(xì)胞
RIN-14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Uhth-74細(xì)胞、TE11細(xì)胞、TE10細(xì)胞
L-5178-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 929細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞
CBRH7919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP100細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞、BT 325細(xì)胞
ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞
H4IIE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1975細(xì)胞、M109細(xì)胞、C4I細(xì)胞
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞
PLA801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBT-2細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞
H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T173細(xì)胞、CMK細(xì)胞、KRCY細(xì)胞
NCIH69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細(xì)胞、H-1963細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞
HEK293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNSH細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞
H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞
NCIH1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞
FO [Mouse myeloma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31/Fujioka細(xì)胞、Colo16細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞
WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞
H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：639 V細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞、NOK細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
H-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
NCIH2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA-Dx5細(xì)胞、OE-21細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞
L 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞
HCC9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU87細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞、T-47D細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
WSU-HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8402細(xì)胞、H2073細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞
FAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dunn LM8細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞
Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA1細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞
SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52-PE細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞、CAMA細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞
OCI-Ly 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H220細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞
NIH:OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞、SR細(xì)胞
HNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN-8細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞
NCI-H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
HCC0095細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞
HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細(xì)胞、CX-1細(xì)胞、KNS62細(xì)胞
OCI-Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THPI細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞
H-1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-2細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
T-47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149 PT細(xì)胞、HT115細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞
WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞
VP 267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞、GM03190細(xì)胞
OsA-CL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE11細(xì)胞、TE6細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞
Sp 2817細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞
EHEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-270細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞、Rh30細(xì)胞
PATU-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞
HCT 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS42細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞
Tsup-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞
32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞、MB 157細(xì)胞
GM03190A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞
L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細(xì)胞、H-1963細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞
SU-DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226細(xì)胞、C4 I細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞
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