"COLO 320DM細(xì)胞：人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞可產(chǎn)生５-羥色胺、去甲、、ACTH和甲狀旁腺素。角蛋白、波形蛋白弱陽(yáng)性。培養(yǎng)條件： RPMI １６４０  １０%FBS
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮+貼壁
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了，減少對(duì)胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì))，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過(guò)度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
細(xì)胞傳代的一般方法：開(kāi)始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬(wàn)單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫(xiě)傳代記錄。
HBL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞
LN-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGCs細(xì)胞、786-0細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞
LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞
VMM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu 19細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞、EM3細(xì)胞
TMD-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-FT細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞
TE-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細(xì)胞、Daudi細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞
Hs 294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 clone D1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞、CHL細(xì)胞
HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞
EFM19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC78細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞
Alexander細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、95D細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞
KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞
TCam-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES-1細(xì)胞、NB-9細(xì)胞、HFF細(xì)胞
McG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞
Capan 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞
WEHI 164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-OA細(xì)胞、H-250細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞
ID8/MOSEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP1細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞
ID8/MOSEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP1細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
H-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI164細(xì)胞、PC3M細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞
GM00637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0410細(xì)胞、H847細(xì)胞、CTSC-3細(xì)胞
GA-10 clone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388.D1細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞
NIH 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞
COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞
Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞
NS1-1 Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1238細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞
ketr 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞
HCC4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞、H-1184細(xì)胞
SK-MEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606.T細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞
RC-4B/C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞
143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞
PANC-04-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-83細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞
OEC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞
A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞
RAW 264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2172細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞
GM01232E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞
H-1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2023細(xì)胞、MIN6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞
HepaRG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞
FHs74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞
L cells (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 422細(xì)胞、H1882細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞
QBI-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G401細(xì)胞、C33-A細(xì)胞、Hs729細(xì)胞
SW-1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞
SHP-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG108-15細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞
H-2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細(xì)胞、H341細(xì)胞、GM04671細(xì)胞
L929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1792細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
KM-H2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞
A-2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2-OS細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞、PK15細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
DoHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞
Capan2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞
Hmy.2 CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細(xì)胞、NE1細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞
NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
IPEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、Mel526細(xì)胞
Rin-M-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞
NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞
MPVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239A細(xì)胞、PL-9細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞
SHIN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞
NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞
HCC0044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞、VERO76細(xì)胞
HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞
H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞
INS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL1細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞
Jiyoye(P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、ECC1細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞
MDA MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞
HuH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C7細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞
SCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mREC細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞
Hs606T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL-83B細(xì)胞、MEF細(xì)胞、HOK細(xì)胞
SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3NIH細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞
LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-8細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPVSMC細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、HFF細(xì)胞
"