"PC-3M細胞：人前列腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
D324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
FU-MMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
Colon 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞
V 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Liver-02細胞、LS 123細胞、Microbiological Associates-104細胞
NCI-H441-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
C33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
LN-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLK細胞、RH30SJ細胞、WM 266-4細胞
Emory University-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞
H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
SKMEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
ARO81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞
Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
Rat-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215A細胞、MDA231細胞、KU-812-F細胞
ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
HT-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
Panc2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞
LS513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
HFL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
D-324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞
OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細胞、MARC-145細胞、HCC0827細胞
Hs 888.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
NCI-H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
NU-GC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
mRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
MC3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
SUPT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
SW-982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
Hep-G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
SK-ES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
769-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
OVCA 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞
SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞
V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞
SVG p12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1688細胞、HEP3B2細胞、CAL78細胞
HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
M-1 myeloid leukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞
0V-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
NCIH1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞
PLA802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
OCI/AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
N-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
MFE 296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
GH 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞
NCI-H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
H-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U937細胞、MV4II細胞、P388細胞
Hs839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞
S.B.細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、NCI-H2073細胞、RASMCs細胞
SU-DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA7細胞、MBdSMC細胞、ST2細胞
H-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U937細胞、TE-6細胞、SKES1細胞
FF-WT-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細胞、FL-83B細胞、NCTC-929細胞
"