"NCI-H3255細胞：人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復(fù)蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
正確的細胞復(fù)蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
U-87MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
SHI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞
H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
COLO 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞
CBRH7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞
OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
MEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
OV433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMO6細胞、SH-SY5Y細胞、RSC96細胞
G-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118MG細胞、U-87MG細胞、HCMEC細胞
G-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118MG細胞、U-87MG細胞、HCMEC細胞
SW 1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞
V-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞
HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
TCMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
BCPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞
C41細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
GL-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞
UMC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
GC1-SPG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞
OE-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
RMG-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞
TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
ME16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
Tca8113細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695T細胞、SUDHL-5細胞、Tu-212細胞
SKG IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
SK-MEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞
UCLA-SO-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H650細胞、HDSMC細胞、H-711細胞
HEp-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞
Clone 15 HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞
SHZ-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
HRA-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
MDA-MB-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
Nittby-Salford 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞
HCC78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
ARPE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞
H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
CAL 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞
X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC1細胞、COR L279細胞、ES-2細胞
HEK-293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞
H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
KMY1022細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞
HCC94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
RD-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
Glioma 261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431細胞、KYSE450細胞、WM 115細胞
MFE-280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
BT483細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞
IR 983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231 #4175細胞、Hep 3B細胞、HS 1.Tes細胞
MDA175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL28細胞、HT-29細胞、NB-4細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Evsa T細胞、NPC-TW-039細胞
Calu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN1細胞、SW-839細胞、COLO394細胞
"