"B95-8細(xì)胞：絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
YD38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-J細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞、143B細(xì)胞
RIN-m 14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1783細(xì)胞、SHG44細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞
UPCISCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞
SNB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP1細(xì)胞、CCD18細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞
Ect1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3-L1細(xì)胞、H-676B細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞
hTERT RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞、H-2108細(xì)胞
COV 434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/EBNA細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞、HT1197細(xì)胞
MDA-MB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD966SK細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞
U-343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞、786-0細(xì)胞
S37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞
VK-2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-445細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞、GLC82細(xì)胞
NCI-H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞
HUT125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE 12細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞
NCI-H102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG1細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞
PIGI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL 16細(xì)胞、HS-683細(xì)胞、Y3細(xì)胞
MT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B6Tert-1細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞
MT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B6Tert-1細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞
ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞
NPA'87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞
SNU878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell細(xì)胞、CMECs細(xì)胞、A-875細(xì)胞
SK-N-DZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-1847細(xì)胞、EC109細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
RM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞
WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞
GM03320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞
HCC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細(xì)胞、KE39細(xì)胞、SW-756細(xì)胞
CHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞
HCT-FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 50細(xì)胞、H3255細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞
SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞
HCC0044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞、VERO76細(xì)胞
Clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1Lu細(xì)胞、HET1A細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞
PY8119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-165細(xì)胞、LN382細(xì)胞、BC-022細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor細(xì)胞：-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
Caco-2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 954細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞
KOSC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-104細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞
MCF12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hs 68細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞、TM4細(xì)胞
H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細(xì)胞、P388細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞
EC-GI-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細(xì)胞、NOR10細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞
IAR 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG-108-15細(xì)胞、N9細(xì)胞、293 F細(xì)胞
LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞
WM-239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞、2PK3細(xì)胞
NCIH508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC893細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞
P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞
WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞
Evsa-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞
IMR32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細(xì)胞、TE8細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞
C3H10T1/2CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細(xì)胞、TE-15細(xì)胞、H-2073細(xì)胞
D407 RPE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H508細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞、GM05384細(xì)胞
Hs 729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA175細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞、SW1463細(xì)胞
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
16HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC38細(xì)胞、RASMC細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞
Walker256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239細(xì)胞、SW-954細(xì)胞、HN4細(xì)胞
W256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞
R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞
MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞
CEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、343 MG細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞
HUV-EC-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞
A 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞、MSB1細(xì)胞
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞
H-548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL-5細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞、HR8348細(xì)胞
RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞
TR146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、T98 G細(xì)胞、TF-1細(xì)胞
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞
NCTC clone 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM 239細(xì)胞
NUGC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞
C 643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 01細(xì)胞、HTh74細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞
NCI-H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞、RSMC細(xì)胞
GM03190A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細(xì)胞、Fu97細(xì)胞、TEC細(xì)胞
Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細(xì)胞、KY180細(xì)胞、MG63細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
UPCISCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞
SKRC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、SNU739細(xì)胞
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