抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-CMKLR1
中文名稱 趨化樣因子受體1抗體
別 名 Chemokine receptor-like 1; CHEMR23; ChemR23; DEZ; Chemokine like receptor 1; G protein coupled receptor ChemR23; G protein coupled receptor DEZ; CML1_HUMAN ; Orphan G protein coupled receptor.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) G蛋白偶聯(lián)受體 表觀遺傳學(xué) G蛋白信號(hào)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 42kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from rat CMKLR1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
下列是趨化樣因子受體1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
尖鐮孢西瓜專化型(西瓜枯萎病菌)現(xiàn)貨,ATCC菌株
火木層孔菌(桑黃)培養(yǎng),ATCC菌株
白阿魏菇保存,ATCC菌株
鮑魚(yú)側(cè)耳售價(jià),ATCC菌株
黑芝現(xiàn)貨,ATCC菌株
皺蓋假芝(血芝)培養(yǎng),ATCC菌株
血紅栓菌保存,ATCC菌株
黃綠蜜環(huán)菌售價(jià),ATCC菌株
芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白(ARNTL)ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator Like Protein (ARNTL)規(guī)格:48T/96T
尿調(diào)蛋白(UMOD)ELISA Kit for Uromodulin (UMOD)規(guī)格:48T/96T
粒細(xì)胞趨化蛋白2(GCP2)ELISA Kit for Granulocyte Chemotactic Protein 2 (GCP2)規(guī)格:48T/96T
鈣同線蛋白2(CLSTN2)ELISA Kit for Calsyntenin 2 (CLSTN2)規(guī)格:48T/96T
胰肪酶(PL)ELISA Kit for Lipase, Pancreatic (PL)規(guī)格:48T/96T
尿黑1,2-雙加氧酶(HGD)ELISA Kit for Homogentisate,2-Dioxygenase (HGD)規(guī)格:48T/96T
激肽釋放酶12(KLK12)ELISA Kit for Kallikrein 12 (KLK12)規(guī)格:48T/96T
RAS癌基因家族成員RAB37(RAB37)ELISA Kit for RAB37, Member RAS Oncogene Family (RAB37)規(guī)格:48T/96T
轉(zhuǎn)膠蛋白(TAGLN)ELISA Kit for Transgelin (TAGLN)規(guī)格:48T/96T
肝配蛋白A4(EFNA4)ELISA Kit for Ephrin A4 (EFNA4)規(guī)格:48T/96T
蛋白二化物異構(gòu)酶A6(PDIA6)ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A6 (PDIA6)規(guī)格:48T/96T
賴酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1)規(guī)格:48T/96T
巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白2抗體Glyasperin A中文名:別名:分子式:C25H26O6
巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白5抗體Mulberrin中文名:桑皮酮C別名:Kuwanon C分子式:C25H26O6
巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白4抗體Isosakuranetin中文名:異櫻花素別名:分子式:C16H14O5
巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白7抗體Morusin中文名:桑根皮素別名:分子式:C25H24O6
巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白8抗體Isobonducellin中文名:別名:分子式:C17H14O4
趨化樣因子受體1抗體 Acidovorax sp.種屬:Acidovorax sp.
分離基物:西沙諾尼成熟果種子內(nèi)
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:LB培養(yǎng)基::酵母提取物 5.0 g 蛋白胨 10.0 g NaCl 10.0 g 瓊脂 15.0 g 蒸餾水 1.0 L pH 7.0,121℃ 15min。
生長(zhǎng)條件:28℃,好氧
存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法食酸菌屬