抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-BTG2
中文名稱 B細(xì)胞遷移基因2抗體
別 名 BTG2_HUMAN; Protein BTG2; BTG family member 2; NGF-inducible anti-proliferative protein PC3; pheochromacytoma cell-3; nerve growth factor-inducible anti-proliferative; B-cell translocation gene 2; BTG2; TIS21; PC3; TIS21.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit, Guinea Pig
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 17kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BTG2 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是B細(xì)胞遷移基因2抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
大麗花輪枝孢現(xiàn)貨,ATCC菌株
出芽短梗霉培養(yǎng),ATCC菌株
赭綠保存,ATCC菌株
黃曲霉售價(jià),ATCC菌株
焦曲霉現(xiàn)貨,ATCC菌株
土曲霉培養(yǎng),ATCC菌株
桔保存,ATCC菌株
繩狀售價(jià),ATCC菌株
腎損傷分子1(Kim1)ELISA Kit for Kidney Injury Molecule 1 (Kim1)規(guī)格:48T/96T
干細(xì)胞因子(SCF)ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF)規(guī)格:48T/96T
P選擇素(SELP)ELISA Kit for Selectin, Platelet (SELP)規(guī)格:48T/96T
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)ELISA Kit for Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)規(guī)格:48T/96T
載蛋白B(APOB)ELISA Kit for Apolipoprotein B (APOB)規(guī)格:48T/96T
血管生成素2(ANGPT2)ELISA Kit for Angiopoietin 2 (ANGPT2)規(guī)格:48T/96T
透明質(zhì)(HA)ELISA Kit for Hyaluronic Acid (HA)規(guī)格:48T/96T
GATA結(jié)合蛋白1(GATA1)ELISA Kit for GATA Binding Protein 1 (GATA1)規(guī)格:48T/96T
載蛋白A2(APOA2)ELISA Kit for Apolipoprotein A2 (APOA2)規(guī)格:48T/96T
狀旁腺激素(PTH)ELISA Kit for Parathyroid Hormone (PTH)規(guī)格:48T/96T
白介素12A(IL12A)ELISA Kit for Interleukin 12A (IL12A)規(guī)格:48T/96T
單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP2)ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 2 (MCP2)規(guī)格:48T/96T
血清白蛋白單克隆抗體Glycitin中文名:黃豆黃苷別名:分子式:C22H22O10
磷酸化絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體GB-1a中文名:別名:(-)-GB-1a分子式:C30H22O10
AEG-1抗體Epimedin B中文名:朝藿定B別名:分子式:C38H48O19
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體α-Naphthoflavone中文名:α-萘黃酮?jiǎng)e名:分子式:C19H12O2
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體Epimedin C中文名:朝藿定C別名:分子式:C39H50O19
B細(xì)胞遷移基因2抗體 Morchella sp.種屬:Morchella sp.
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:研究;生產(chǎn)。食用。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件:25℃,好氧。
生長(zhǎng)特性8天長(zhǎng)滿斜面,菌絲灰白色、稀疏。
存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法羊肚菌屬